Въведение: В книгата са представени всички видове химични вещества, които се използват в химията.
Основната цел на това изследване е оценка на възможността за определяне на основни лекарства в биологични течности чрез публично достъпни експресни методи в домашни условия. Настоящата статия дава отговор на следните въпроси: 1.
- Дали аптечният тест за $3-20 наистина разкрива факта на употреба на обявените вещества? (Класическите комбинирани тестови ленти съдържат скали за определяне на амфетамин, метамфетамин, кокаин, марихуана, опиати).
- Могат ли тези тестови ленти да бъдат полезни за алфа-ПВП и мефедрон? (В аптеките няма специализирани тестове)
Причината за използването на най-разпространените тестове в аптеките, които се купуват лесно, е, че изследването трябва да е полезно и да има практическо приложение.
Важно: могат да се използват и други комплекти за тестове за латерален поток (ЛТТ) с различни етикети, като компанията производител няма значение, защото всеки комплект ленти за тест има един и същ механизъм на работа и е със сравнима ефективност.
За LFT.
Тестовете с латерален поток (LFT), известни също като имунохроматографски тестове с латерален поток или бързи тестове, са прости устройства, предназначени за откриване на наличието на целево вещество в течна проба, без да е необходимо специализирано и скъпо оборудване. Тези тестове намират широко приложение в медицинската диагностика за домашно тестване, тестване на място или в лаборатория. Например домашният тест за бременност е ЛФТ, който открива специфичен хормон. Тези тестове са прости, икономични и обикновено показват резултати за около пет до 30 минути. Много лабораторни приложения повишават чувствителността на простите ЛФТ чрез използване на допълнително специализирано оборудване.
Тестовете за ЛФТ работят на същите принципи като ензимните имуносорбентни тестове (ELISA). По същество тези тестове прекарват течната проба по повърхността на подложка с реактивни молекули, които показват визуален положителен или отрицателен резултат. Подложките се основават на поредица от капилярни легла, като например парчета пореста хартия, микроструктуриран полимер или синтерован полимер. Всяка от тези подложки има способността да пренася спонтанно течност (напр. урина, кръв, слюнка).
Подложката за проби действа като гъба и задържа излишъка от течност за проби. След като се напои, течността се насочва към втората конюгатна подложка, в която производителят е съхранил лиофилизирани биологично активни частици, наречени конюгати (вж. по-долу), в матрица от сол и захар. Конюгатната подложка съдържа всички реактиви, необходими за оптимизирана химическа реакция между целевата молекула (напр. антиген) и нейния химически партньор (напр. антитяло), който е имобилизиран върху повърхността на частицата. Тези знаци маркират целевите частици при преминаването им през подложката и продължават от другата страна към тестовите и контролните линии. Тестовата линия показва сигнал, често с цвят, както при тестовете за бременност. Контролната линия съдържа афинитетни лиганди, които показват дали пробата е преминала през нея и дали биомолекулите в конюгираната подложка са активни. След като премине през тези реакционни зони, течността попада в крайния порест материал - фитила, който просто изпълнява ролята на контейнер за отпадъци.
Тестовете за ЛФТ работят на същите принципи като ензимните имуносорбентни тестове (ELISA). По същество тези тестове прекарват течната проба по повърхността на подложка с реактивни молекули, които показват визуален положителен или отрицателен резултат. Подложките се основават на поредица от капилярни легла, като например парчета пореста хартия, микроструктуриран полимер или синтерован полимер. Всяка от тези подложки има способността да пренася спонтанно течност (напр. урина, кръв, слюнка).
Подложката за проби действа като гъба и задържа излишъка от течност за проби. След като се напои, течността се насочва към втората конюгатна подложка, в която производителят е съхранил лиофилизирани биологично активни частици, наречени конюгати (вж. по-долу), в матрица от сол и захар. Конюгатната подложка съдържа всички реактиви, необходими за оптимизирана химическа реакция между целевата молекула (напр. антиген) и нейния химически партньор (напр. антитяло), който е имобилизиран върху повърхността на частицата. Тези знаци маркират целевите частици при преминаването им през подложката и продължават от другата страна към тестовите и контролните линии. Тестовата линия показва сигнал, често с цвят, както при тестовете за бременност. Контролната линия съдържа афинитетни лиганди, които показват дали пробата е преминала през нея и дали биомолекулите в конюгираната подложка са активни. След като премине през тези реакционни зони, течността попада в крайния порест материал - фитила, който просто изпълнява ролята на контейнер за отпадъци.
Съществуват два вида LFT: директен и конкурентен метод.
При директния (сандвич) LFT се използва конюгат от антитела и маркери, нанесен върху конюгатна мембрана. Специфичните за този аналит антитела са имобилизирани върху тестовата линия, а антивидовите антитела, специфични за първичните антитела, са имобилизирани върху контролната линия. Когато пробата, която съдържа анализирано вещество, се нанесе върху тестовата ивица и тази проба попадне върху мембраната с конюгата, аналитът се свързва с конюгата АТ-таг. След това имунният комплекс навлиза в тестовата зона, където се свързва със специфични антитела, образувайки "сандвич" от Ab-Ag-Ab-tag. Излишъкът от несвързан конюгат се свързва с антивидови антитела на контролната линия. Следователно 2 линии на тест лентата са положителен резултат от теста. Ако в пробатаняма анализирано вещество, конюгатът се свързва с антивидовите антитела само на контролната линия, образувайки една линия на тест лентата. Методът на директния ЛФТ се използва за откриване на високомолекулни съединения - вируси, включително ХИВ; различни хормони (например при тестове за бременност), патогени на инфекциозни заболявания.
Конкурентният LFT метод, използван за определяне на съединения с ниско молекулно тегло, се основава на конкуренцията между аналита и имобилизирания конюгат аналит:носещ протеин за ограничен брой места за свързване на специфични антитела, съдържащи се в конюгата Ab-tag. Когато се приложи проба, съдържаща аналит, той се свързва с АТ-таг конюгата върху конюгатната мембрана. След това имунният комплекс преминава през тестовата зона, където е имобилизиран конюгатът аналит:носещ протеин. Имунокомплексът не може да се свърже с този конюгат поради стерични пречки: нискомолекулните съединения обикновено имат една антигенна детерминанта и съответно антителата имат едно място за свързване с антигена, което вече е заето от аналита. След това имунният комплекс се свързва с антивидови антитела на контролната линия. В резултат на това отсъствието на цветна ивица в тестовата зона и наличието на цвят в контролната зона показва, че концентрацията на аналита в тестовата проба превишава праговата стойност за този тест.
Ако няма анализиран в пробата, конюгатът Ab-tag се свързва с конюгата Ag:носещ протеин, имобилизиран в зоната на тестовата линия. Несвързаният Ab-tag конюгат навлиза в зоната на контролната линия и се свързва там с антивидови антитела. По този начин наличието на две оцветени линии (тестова и контролна) е отрицателен резултат от анализа.
Конкурентният формат на LFT се използва за откриване на съединения с ниско молекулно тегло, включително метаболити на наркотични съединения в урина, орална течност и тъканни екстракти.
Конкурентният LFT метод, използван за определяне на съединения с ниско молекулно тегло, се основава на конкуренцията между аналита и имобилизирания конюгат аналит:носещ протеин за ограничен брой места за свързване на специфични антитела, съдържащи се в конюгата Ab-tag. Когато се приложи проба, съдържаща аналит, той се свързва с АТ-таг конюгата върху конюгатната мембрана. След това имунният комплекс преминава през тестовата зона, където е имобилизиран конюгатът аналит:носещ протеин. Имунокомплексът не може да се свърже с този конюгат поради стерични пречки: нискомолекулните съединения обикновено имат една антигенна детерминанта и съответно антителата имат едно място за свързване с антигена, което вече е заето от аналита. След това имунният комплекс се свързва с антивидови антитела на контролната линия. В резултат на това отсъствието на цветна ивица в тестовата зона и наличието на цвят в контролната зона показва, че концентрацията на аналита в тестовата проба превишава праговата стойност за този тест.
Ако няма анализиран в пробата, конюгатът Ab-tag се свързва с конюгата Ag:носещ протеин, имобилизиран в зоната на тестовата линия. Несвързаният Ab-tag конюгат навлиза в зоната на контролната линия и се свързва там с антивидови антитела. По този начин наличието на две оцветени линии (тестова и контролна) е отрицателен резултат от анализа.
Конкурентният формат на LFT се използва за откриване на съединения с ниско молекулно тегло, включително метаболити на наркотични съединения в урина, орална течност и тъканни екстракти.
По-просто обяснение.
Ако не разбирате, бих обяснил по по-прост начин. В началото на всяка тестова лента има маркирани антитела. Поради структурата на тест лентата урината се разпространява по нея, като пренася получените комплекси в тестовата зона, където са фиксирани връзките наркотик-протеин. Тъй като антитялото от пристигналия имунен комплекс вече е поето от лекарството от урината, то не може да се прикрепи в тестовата зона и се придвижва по-нататък към контролната зона, където се свързва с антивидовото антитяло, оцветявайки една лента на скалата (положителен резултат).
Ако в биопробата няма наркотик, антителата се движат в урината по тестовата лента, като остават свободни. Когато комплексът антитяло-белтък се срещне в тестовата зона, към него се прикрепват някои маркирани антитела (появява се първата лента), а останалите се придвижват с потока урина в контролната зона, където също се свързват с антивидовото антитяло, оцветявайки втората лента (2 ленти - отрицателен резултат). Ако линията се появи в тестовата зона, но не се появи в контролната зона (трябва да се появява винаги) - тестът е дефектен.
Ако в биопробата няма наркотик, антителата се движат в урината по тестовата лента, като остават свободни. Когато комплексът антитяло-белтък се срещне в тестовата зона, към него се прикрепват някои маркирани антитела (появява се първата лента), а останалите се придвижват с потока урина в контролната зона, където също се свързват с антивидовото антитяло, оцветявайки втората лента (2 ленти - отрицателен резултат). Ако линията се появи в тестовата зона, но не се появи в контролната зона (трябва да се появява винаги) - тестът е дефектен.
Веществата са използвани от доброволци, които не са приемали нищо психоактивно за достатъчен период от време, като за анализа им е взета урина. Ето и резултатите от експеримента.
Експерименти.
АМФЕТАМИНОсновни метаболити: амфетамин, 4-хидроксиамфетамин, 4-хидроксинорефедрин, 4-хидроксифенилацетон, бензоена киселина, хипурова киселина, норефедрин, фенилацетон.
КОКАИН.
Основни метаболити: бензоилекгонин, метилов естер на екгонин, екгонин, норкокаин, р-хидроксикаин, м-хидроксикаин, р-хидроксибензоилекгонин, м-хидроксибензоилекгонин.
Ако погледнете теста вдясно, можете да видите защо тестовите ленти трябва да се обработват с критична гледна точка. Тестваното лице не е употребявало наскоро ПАВ, с изключение на кокаин.
ХЕРОИН.
Основни метаболити: морфин, норморфин, хидроморфон.
MDMA / ЕКСТАЗИ.
Основни метаболити: 3,4-метилендиоксиметамфетамин (MDMA), 3,4-метилендиоксиамфетамин (MDA), 4-хидрокси-3-метоксиметамфетамин (HMMA), 4-хидрокси-3-метоксиамфетамин (HMA).
Съществуват тестови ленти за MDMA/екстази, но те се намират по-трудно. В урината са открити амфетамин и метамфетамин. Това се обяснява с общата им принадлежност към един и същи клас и съответно със структурното сходство на веществата и техните метаболити. Скалите THC (канабиноиди) и OPI (опиати) при втория тест не участват в експеримента (не са активирани). Според лявата снимка тези вещества не се откриват във връзка с употребата на MDMA.
МЕФЕДРОН.
Основни метаболити: мефедрон, нор-мефедрон, 4'-карбокси-мефедрон, 1'-дихидро-мефедрон, N-сукцинил-нор-мефедрон.
Интересен коментар от редакторите на сайта https://www.zoomtesting.co.uk:"Някои продавачи посочват, че тестът за метамфетамин може да се използва за откриване на мефедрон. Това обаче е невярно. Химическата структура на метамфетамина и меферона е различна, така че тестът за метамфетамин няма да е валиден за мефедрон". Е, нека да проверим това.
В допълнение към стандартните вещества е използвана още една тестова лента за изследване на барбитурати. Явно нещо не е наред с тази тестова лента. Тестът е повторен от друг доброволец, който никога не е употребявал барбитурати или съдържащи ги препарати, със сходен резултат.
ALPHA-PVP (алфа-пиролидинвалерофенон).
Втората линия в прозореца на PCP почти напълно отсъства.
MARIJUANA.
Основни метаболити: тетрахидроканабинол (THC), 11-хидрокси-THC, 11-нор-9-карбокси-THC. Канабисът се определя добре и винаги само в прозореца си "THC" (тетрахидроканабинол), достатъчно е да се докаже на най-простия тест.
Заключение.
Тестовете откриват наркотици в телесните течности много по-дълго, отколкото се усеща психоактивният им ефект. Те са доста евтини, имат добра чувствителност и само незначително отстъпват на методите, използвани в лабораторията. Не забравяйте за своята безопасност - ако има нужда сами да проверите своята "чистота", експресните тестове ще бъдат незаменими.
Last edited by a moderator: