Въведение: В книгата са представени всички видове химични вещества, които се използват в химията.
Как работи тънкослойната хроматография?
Приготвяне.
Изготвяне на хроматограмата.
Вземете един пластмасов или стъклен буркан, налейте 10-15 мл вода, 4-5 капки спиртен разтвор на йод. Разбърквайте в продължение на 7-10 минути. Изцедете водата. Йодът се утаява във водата по стените на буркана. Поставете този буркан в контейнер.
Коефициент на задържане
След приключване на разделянето отделните съединения се появяват като петна, разделени вертикално. Всяко петно има коефициент на задържане (Rf), който е равен на разстоянието, на което е мигрирало, спрямо общото разстояние, изминато от разтворителя. Формулата за Rf е Rf=разстояние, изминато от пробата/разстояние, изминато от разтворителя.
Стойността на Rf може да се използва за идентифициране на съединенията поради уникалността си за всяко съединение. Когато се сравняват две различни съединения при едни и същи условия, съединението с по-голяма Rf стойност е по-малко полярно, защото не се задържа толкова дълго върху стационарната фаза, колкото полярното съединение, което би имало по-ниска Rf стойност. Стойностите на Rf и възпроизводимостта могат да бъдат повлияни от редица различни фактори, като например дебелината на слоя, влагата върху TLC плочата, насищането на съда, температурата, дълбочината на подвижната фаза, естеството на TLC плочата, размера на пробата и параметрите на разтворителя. Тези ефекти обикновено водят до увеличаване на стойностите на Rf. В случай на дебелина на слоя обаче стойността на Rf ще намалее, тъй като подвижната фаза се движи по-бавно нагоре по плочата.
Обсъждане на резултатите
метамфетамин - 0,55
Мефедрон - 0,65
Заключение.
Хроматографията се използва за разделяне на смеси от вещества на техните компоненти. Всички форми на хроматография работят на един и същ принцип. В тази статия ще обясня този метод, като определя Rf на амфетамин метамфетамин и мефедрон.
Хроматографските плочи имат стационарна фаза (твърдо тяло или течност, поддържана върху твърдо тяло) и подвижна фаза (течност или газ). Подвижната фаза преминава през стационарната фаза и пренася компонентите на сместа със себе си. Различните компоненти се движат с различна скорост. Ще разгледаме причините за това по-нататък в страницата. Тънкослойната хроматография се извършва точно както е написано - с помощта на тънък, равномерен слой силикагел или алуминиев оксид, покрит върху парче стъкло, метал или твърда пластмаса. Силикагелът (или алуминиевият оксид) е стационарната фаза. Стационарната фаза при тънкослойната хроматография често съдържа и вещество, което флуоресцира на ултравиолетова светлина или в йодна камера - по причини, които ще видите по-късно. Подвижната фаза е подходящ течен разтворител или смес от разтворители.
Хроматографските плочи имат стационарна фаза (твърдо тяло или течност, поддържана върху твърдо тяло) и подвижна фаза (течност или газ). Подвижната фаза преминава през стационарната фаза и пренася компонентите на сместа със себе си. Различните компоненти се движат с различна скорост. Ще разгледаме причините за това по-нататък в страницата. Тънкослойната хроматография се извършва точно както е написано - с помощта на тънък, равномерен слой силикагел или алуминиев оксид, покрит върху парче стъкло, метал или твърда пластмаса. Силикагелът (или алуминиевият оксид) е стационарната фаза. Стационарната фаза при тънкослойната хроматография често съдържа и вещество, което флуоресцира на ултравиолетова светлина или в йодна камера - по причини, които ще видите по-късно. Подвижната фаза е подходящ течен разтворител или смес от разтворители.
Силикагелът е форма на силициев диоксид (силициев диоксид). Силициевите атоми са свързани чрез кислородни атоми в гигантска ковалентна структура. На повърхността на силикагела обаче силициевите атоми са свързани с -OH групи. Така че на повърхността на силикагела има връзки Si-O-H вместо връзки Si-O-Si. На схемата е показана малка част от повърхността на силициевия диоксид. Повърхността на силикагела е много полярна и поради -OH групите може да образува водородни връзки с подходящи съединения около нея, както и дисперсионни сили на Ван-дер-Валс и дипол-диполно привличане.
Необходими са ви:
1. Спринцовка за 5 ml х 4
2. Пластмасов буркан за изследване на урина х 4
3. Големи пластмасови контейнери за храна (или една голяма чаша и пластмасов контейнер) х 2
4. TLC плака със слой силикагел 5x10 cm (можете да отрежете голямата плака с ножица)
5. Разтворители етилов ацетат, метанол, хексан (може да се замени с въглероден тетрахлорид), воден разтвор на амоняк 10 % или повече, алкохолен разтвор на йод
6. Мек молив, линийка и клещи
Не забравяйте за ръкавиците и респиратора, осигурете експеримента в проветриво помещение.
1. Спринцовка за 5 ml х 4
2. Пластмасов буркан за изследване на урина х 4
3. Големи пластмасови контейнери за храна (или една голяма чаша и пластмасов контейнер) х 2
4. TLC плака със слой силикагел 5x10 cm (можете да отрежете голямата плака с ножица)
5. Разтворители етилов ацетат, метанол, хексан (може да се замени с въглероден тетрахлорид), воден разтвор на амоняк 10 % или повече, алкохолен разтвор на йод
6. Мек молив, линийка и клещи
Не забравяйте за ръкавиците и респиратора, осигурете експеримента в проветриво помещение.
Изготвяне на хроматограмата.
1. Трябва да приготвите флуентен разтвор на разтвор на етилов ацетат:метанол:амоняк 85:10:5. За 10 ml трябва да вземете 8,5 ml етилов ацетат, 1 ml метанол и 0,5 ml амонячен разтвор и да ги разбъркате.
2. Почистете плаката със силикагел с този разтвор. Поставете плочата в разтвора, като дълбочината ѝ трябва да е 3-4 мм в голяма чаша (както е показано на фиг. 1). Можете да използвате пинсети за удобни манипулации. Важно: не мокрете плаката с вода, защото ще се развали. Трябва да държите плочата в разтвора, докато предната част на разтворителя стигне до горния ръб на плочата.
3. Ще започнем с един прост случай. Има четири вещества: амфетамин(A), метамфетамин(L), кофеин(K) и мефедрон(M).
За този експеримент трябва да получите свободна база от наркотици. Поставете 10-15 mg от пробата (няколко бучки) в стъклен (пластмасов) буркан, чист две капки воден разтвор на амоняк. След това налейте 3-4 капки хексан или въглероден тетрахлорид и разклатете една минута. Свободната основа на вашето лекарство се разрежда в органичния слой.4. Сега трябва да го поставите върху хроматографската плака, която е подготвена по-рано. Вземете игла от спринцовката и я срежете с клещи, както е в примера. Трябва да получите плосък ръб.
Вземете чиста и изсушена плака и начертайте с молив линия на ~5-6 мм нагоре от долния ръб. Всяко обозначение върху плаката, което показва първоначалното положение на капката, също трябва да е с молив. Ако нещо от това е направено с мастило, багрилата от мастилото също ще се преместят при развитието на хроматограмата. Отбележете четири точки на еднакво разстояние помежду им. Потопете края на срязаната игла в органичния слой на първия наркотичен разтвор. Докоснете плаката с върха на иглата и направете малка точка с диаметър 3-4 mm, изчакайте да изсъхне, повторете процедурата 10 пъти. Повторете етапи 2 и 3 за други вещества.
Често срещана грешка: не правете голямо мазно петно, защото вашето вещество може да се наложи върху друго вещество по време на експеримента.
5. Когато петната от свободни основи са сухи, плаката се поставя в плитък слой разтворител в покрита чаша. Важно е нивото на разтворителя да е под линията с петното върху него. Изчакайте, докато фронтът на разтворителя достигне 4-5 mm преди горния ръб на плаката, и я извадете. След това начертайте с молив линия върху предната линия на разтворителя. Изсушете я на въздух.
6. Хроматограмата се поставя в затворен съд (например друга чаша, покрита с часовниково стъкло, или големи пластмасови контейнери) заедно с няколко йодни кристала. Парите на йода в контейнера реагират с петната върху хроматограмата. Веществата, които ви интересуват, могат да се появят като цветни петна. Проследете ги с молив и нарисувайте точки в центъра на всяко петно.
Също така можете да използвате UV лампа с дължина на вълната 254 и 365 nm.
Как да подготвите йодната камера.Често срещана грешка: не правете голямо мазно петно, защото вашето вещество може да се наложи върху друго вещество по време на експеримента.
5. Когато петната от свободни основи са сухи, плаката се поставя в плитък слой разтворител в покрита чаша. Важно е нивото на разтворителя да е под линията с петното върху него. Изчакайте, докато фронтът на разтворителя достигне 4-5 mm преди горния ръб на плаката, и я извадете. След това начертайте с молив линия върху предната линия на разтворителя. Изсушете я на въздух.
Вземете един пластмасов или стъклен буркан, налейте 10-15 мл вода, 4-5 капки спиртен разтвор на йод. Разбърквайте в продължение на 7-10 минути. Изцедете водата. Йодът се утаява във водата по стените на буркана. Поставете този буркан в контейнер.
Коефициент на задържане
След приключване на разделянето отделните съединения се появяват като петна, разделени вертикално. Всяко петно има коефициент на задържане (Rf), който е равен на разстоянието, на което е мигрирало, спрямо общото разстояние, изминато от разтворителя. Формулата за Rf е Rf=разстояние, изминато от пробата/разстояние, изминато от разтворителя.
При експеримента получих три петна вместо очакваните четири. Повтарянето на експеримента показва, че кофеинът не се елуира от разтвор на етилцетат:метанол:амоняк 85:10:5. Експериментално е потвърдено, че този разтвор е подходящ за елуиране на наркотици като амфетамин, метамфетамин и мефедрон.
Rf на изследваните наркотици.
Амфетамин - 0,53метамфетамин - 0,55
Мефедрон - 0,65
Обяснение.
Имам две плочки с резултати. Две измерени разстояния между началната точка и средата на обграденото петно. Амфетаминовото петно мина 42 в първата плака и 49 мм във втората плака от стартовата линия, предната линия на разтворителя мина съответно 85 и 86 мм. Rf1=42/85=0.49, Rf2=49/86=0.52. След това изчислих средната аритметична стойност 0,53. Същите изчисления бяха направени и за други вещества.
Имам две плочки с резултати. Две измерени разстояния между началната точка и средата на обграденото петно. Амфетаминовото петно мина 42 в първата плака и 49 мм във втората плака от стартовата линия, предната линия на разтворителя мина съответно 85 и 86 мм. Rf1=42/85=0.49, Rf2=49/86=0.52. След това изчислих средната аритметична стойност 0,53. Същите изчисления бяха направени и за други вещества.
Заключение.
Както показва експериментът, можете да измерите Rf на вашето лекарство и да го сравните с познато вещество в същата плака. Направете петно от вашето лекарство без основа и 1-4 петна от други лекарства, за да проверите Rf. Ако петната са на едно и също разстояние от стартовата линия, то вероятно става въпрос за едно и също вещество. Също така, ако получите няколко петна от вашето лекарство, вероятно имате смес от вещества. Някои лекарства имат няколко петна, защото са смес от лекарство и странични продукти от синтеза. Въпреки това можете да ги сравните с други наркотици, като използвате тънкослойна хроматография.
Attachments
Last edited by a moderator:
