Úvod: V knize je popsán vývoj chemických látek, které jsou součástí chemického průmyslu.
Hlavním cílem tohoto výzkumu je zhodnocení možnosti stanovení hlavních léčiv v biologických tekutinách pomocí doma veřejně dostupných expresních metod. Tento článek odpovídá na následující otázky.
- Odhalují lékárenské testy na 3-20 dolarů skutečně skutečnost užívání deklarovaných látek? (Klasické kombinované testovací proužky obsahují stupnice pro stanovení amfetaminu, metamfetaminu, kokainu, marihuany, opiátů).
- Mohou být tyto testovací proužky užitečné pro alfa-PVP a mefedron? (V lékárnách neexistují specializované testy).
Důvodem použití nejběžnějších testů z lékáren, které se dají snadno koupit, je to, že výzkum by měl být užitečný a mít praktické využití.
Důležité: Mohly by být použity i jiné soupravy pro testování laterálního toku (LFT) s různými označeními, na firmě výrobce nezáleží, protože všechny testovací proužky mají stejný pracovní mechanismus a mají srovnatelnou účinnost.
O LFT.
Laterální průtokové testy (LFT), známé také jako laterální průtokové imunochromatografické testy nebo rychlé testy, jsou jednoduchá zařízení určená k detekci přítomnosti cílové látky v kapalném vzorku bez nutnosti použití specializovaného a nákladného vybavení. Tyto testy jsou široce používány v lékařské diagnostice pro domácí testování, testování v místě péče nebo pro laboratorní použití. Například domácí těhotenský test je LFT, který detekuje specifický hormon. Tyto testy jsou jednoduché, ekonomické a obvykle ukazují výsledky přibližně za pět až 30 minut. Mnoho laboratorních aplikací zvyšuje citlivost jednoduchých LFT použitím dalšího specializovaného vybavení.
LFT fungují na stejném principu jako enzymatické imunosorbentní testy (ELISA). Tyto testy v podstatě vedou tekutý vzorek po povrchu podložky s reaktivními molekulami, které vykazují vizuální pozitivní nebo negativní výsledek. Podložky jsou založeny na sérii kapilár, jako jsou kousky porézního papíru, mikrostrukturovaného polymeru nebo slinutého polymeru. Každá z těchto podložek má schopnost samovolně transportovat tekutinu (např. moč, krev, sliny).
Vzorkovací podložka funguje jako houba a zadržuje přebytek vzorkované tekutiny. Po nasáknutí tekutina stéká do druhé konjugované podložky, v níž výrobce uložil lyofilizované bioaktivní částice nazývané konjugáty (viz níže) v matrici soli a cukru. Konjugátová podložka obsahuje všechna činidla potřebná pro optimalizovanou chemickou reakci mezi cílovou molekulou (např. antigenem) a jejím chemickým partnerem (např. protilátkou), který byl imobilizován na povrchu částice. Tyto značky označují cílové částice při průchodu podložkou a pokračují napříč ke zkušebním a kontrolním liniím. Na testovací linii se zobrazí signál, často barevný, jako u těhotenských testů. Kontrolní linie obsahuje afinitní ligandy, které ukazují, zda vzorek prošel a biomolekuly v konjugované podložce jsou aktivní. Po průchodu těmito reakčními zónami se tekutina dostane do konečného porézního materiálu, knotu, který jednoduše slouží jako nádoba na odpad.
LFT fungují na stejném principu jako enzymatické imunosorbentní testy (ELISA). Tyto testy v podstatě vedou tekutý vzorek po povrchu podložky s reaktivními molekulami, které vykazují vizuální pozitivní nebo negativní výsledek. Podložky jsou založeny na sérii kapilár, jako jsou kousky porézního papíru, mikrostrukturovaného polymeru nebo slinutého polymeru. Každá z těchto podložek má schopnost samovolně transportovat tekutinu (např. moč, krev, sliny).
Vzorkovací podložka funguje jako houba a zadržuje přebytek vzorkované tekutiny. Po nasáknutí tekutina stéká do druhé konjugované podložky, v níž výrobce uložil lyofilizované bioaktivní částice nazývané konjugáty (viz níže) v matrici soli a cukru. Konjugátová podložka obsahuje všechna činidla potřebná pro optimalizovanou chemickou reakci mezi cílovou molekulou (např. antigenem) a jejím chemickým partnerem (např. protilátkou), který byl imobilizován na povrchu částice. Tyto značky označují cílové částice při průchodu podložkou a pokračují napříč ke zkušebním a kontrolním liniím. Na testovací linii se zobrazí signál, často barevný, jako u těhotenských testů. Kontrolní linie obsahuje afinitní ligandy, které ukazují, zda vzorek prošel a biomolekuly v konjugované podložce jsou aktivní. Po průchodu těmito reakčními zónami se tekutina dostane do konečného porézního materiálu, knotu, který jednoduše slouží jako nádoba na odpad.
Existují dva typy LFT: přímá a kompetitivní metoda.
Přímá (sendvičová) LFT používá konjugát protilátky a značky vtištěný na konjugovanou membránu. Protilátky specifické pro tento analyt jsou imobilizovány na testovací linii a protilátky specifické pro primární protilátky jsou imobilizovány na kontrolní linii. Když se na testovací proužek nanese vzorek, který obsahuje analyzovanou látku, a tento vzorek narazí na membránu s konjugátem, analyt se naváže na konjugát AT-tag. Poté se imunitní komplex dostane do testovací zóny, kde se naváže na specifické protilátky a vytvoří "sendvič" Ab-Ag-Ab-tag. Přebytek nenavázaného konjugátu se váže na protilátky proti druhu na kontrolní linii. Proto 2 čárky na testovacím proužku znamenají pozitivní výsledek testu. Pokud ve vzorkunení žádná analyzovaná látka, konjugát se váže s protilátkami proti druhu pouze na kontrolní linii a na testovacím proužku se vytvoří jedna linie. Přímá metoda LFT se používá k detekci vysokomolekulárních látek - virů, včetně HIV; různých hormonů (například v těhotenských testech), původců infekčních onemocnění.
Kompetitivní metodaLFT používaná pro stanovení nízkomolekulárních sloučenin je založena na soutěži mezi analytem a imobilizovaným konjugátem analytu a nosného proteinu o omezený počet vazebných míst pro specifické protilátky obsažené v konjugátu Ab-tag. Když se aplikuje vzorek obsahující analyt, váže se na konjugát AT-tag na konjugované membráně. Imunitní komplex pak prochází testovací zónou, kde je imobilizován konjugát analyt:nosný protein. Imunokomplex se na tento konjugát nemůže navázat kvůli sterickým překážkám: nízkomolekulární sloučeniny mají obvykle jednu antigenní determinantu, a proto mají protilátky jedno vazebné místo pro antigen, které je již obsazeno analytem. Dále se imunitní komplex naváže protilátkami proti druhu na kontrolní linii. V důsledku toho nepřítomnost barevného proužku v testovací zóně a přítomnost barvy v kontrolní zóně znamená, že koncentrace analytu v testovaném vzorku přesahuje jeho prahovou hodnotu pro tento test.
Pokud ve vzorku není žádný analyzovaný pás, konjugát Ab-tag se váže na konjugát Ag:nosný protein imobilizovaný v zóně testovací linie. Nenavázaný konjugát Ab-tag se dostane do zóny kontrolní linie a naváže se tam s protilátkami proti druhu. Přítomnost dvou barevných linií (testovací a kontrolní) tedy znamená negativní výsledek analýzy.
Konkurenční formát LFT se používá k detekci nízkomolekulárních sloučenin, včetně metabolitů omamných látek v moči, ústní tekutině a tkáňových extraktech.
Kompetitivní metodaLFT používaná pro stanovení nízkomolekulárních sloučenin je založena na soutěži mezi analytem a imobilizovaným konjugátem analytu a nosného proteinu o omezený počet vazebných míst pro specifické protilátky obsažené v konjugátu Ab-tag. Když se aplikuje vzorek obsahující analyt, váže se na konjugát AT-tag na konjugované membráně. Imunitní komplex pak prochází testovací zónou, kde je imobilizován konjugát analyt:nosný protein. Imunokomplex se na tento konjugát nemůže navázat kvůli sterickým překážkám: nízkomolekulární sloučeniny mají obvykle jednu antigenní determinantu, a proto mají protilátky jedno vazebné místo pro antigen, které je již obsazeno analytem. Dále se imunitní komplex naváže protilátkami proti druhu na kontrolní linii. V důsledku toho nepřítomnost barevného proužku v testovací zóně a přítomnost barvy v kontrolní zóně znamená, že koncentrace analytu v testovaném vzorku přesahuje jeho prahovou hodnotu pro tento test.
Pokud ve vzorku není žádný analyzovaný pás, konjugát Ab-tag se váže na konjugát Ag:nosný protein imobilizovaný v zóně testovací linie. Nenavázaný konjugát Ab-tag se dostane do zóny kontrolní linie a naváže se tam s protilátkami proti druhu. Přítomnost dvou barevných linií (testovací a kontrolní) tedy znamená negativní výsledek analýzy.
Konkurenční formát LFT se používá k detekci nízkomolekulárních sloučenin, včetně metabolitů omamných látek v moči, ústní tekutině a tkáňových extraktech.
Jednodušší vysvětlení.
Pokud tomu nerozumíte, vysvětlil bych to jednodušeji. Na začátku každého testovacího proužku jsou označené protilátky. Vzhledem ke struktuře testovacího proužku se po něm šíří moč, která vzniklé komplexy přenáší do testovací oblasti, kde jsou fixovány vazby mezi drogou a bílkovinou. Protože protilátka z dorazivšího imunitního komplexu je již vychytána drogou z moči, nemůže se v testovací zóně navázat a přesune se dále do kontrolní zóny, kde se naváže na protilátku proti druhu a zbarví jeden proužek na stupnici (pozitivní výsledek).
Pokud v biovzorku není žádná droga, protilátky se pohybují v moči podél testovacího proužku a zůstávají volné. Když se komplex protilátka-protein setká v testovací oblasti, naváže se na něj část označených protilátek (objeví se první proužek), zbytek se pohybuje s proudem moči v kontrolní oblasti, kde se rovněž naváže na protilátku proti druhu, zvýraznění druhého proužku (2 proužky - negativní výsledek). Pokud se proužek objeví v testovací zóně, ale neobjeví se v kontrolní zóně (měl by se objevit vždy) - test je chybný.
Pokud v biovzorku není žádná droga, protilátky se pohybují v moči podél testovacího proužku a zůstávají volné. Když se komplex protilátka-protein setká v testovací oblasti, naváže se na něj část označených protilátek (objeví se první proužek), zbytek se pohybuje s proudem moči v kontrolní oblasti, kde se rovněž naváže na protilátku proti druhu, zvýraznění druhého proužku (2 proužky - negativní výsledek). Pokud se proužek objeví v testovací zóně, ale neobjeví se v kontrolní zóně (měl by se objevit vždy) - test je chybný.
Látky užili dobrovolníci, kteří po dostatečně dlouhou dobu nic psychoaktivního neužívali, k jejich analýze byla odebrána moč. Zde jsou výsledky experimentu.
Experimenty: V průběhu experimentu bylo zjištěno, že se jedná o pokusy, při kterých se používá alkohol.
AMFETAMINHlavní metabolity: amfetamin, 4-hydroxyamfetamin, 4-hydroxynorefedrin, 4-hydroxyfenylaceton, kyselina benzoová, kyselina hippurová, norefedrin, fenylaceton.
COCAINE: KOKAIN, KTERÝ SE VYSKYTUJE NA ÚZEMÍ ČESKÉ REPUBLIKY, SE VYSKYTUJE NA ÚZEMÍ ČESKÉ REPUBLIKY, KDE SE VYSKYTUJE NA ÚZEMÍ ČESKÉ REPUBLIKY.
Hlavní metabolity: benzoylekgonin, metylester ekgoninu, ekgonin, norkokain, p-hydroxykain, m-hydroxykain, p-hydroxybenzoylekgonin, m-hydroxybenzoylekgonin.
Pokud se podíváte na test vpravo, uvidíte, proč je třeba s testovacími proužky zacházet s kritickým pohledem. Testovaná osoba v poslední době neužívala žádné PAS, kromě kokainu.
HEROIN.
Hlavní metabolity: morfin, normorfin, hydromorfon.
MDMA / EXTÁZE.
Hlavní metabolity: 3,4-methylendioxymetamfetamin (MDMA), 3,4-methylendioxyamfetamin (MDA), 4-hydroxy-3-methoxymetamfetamin (HMMA), 4-hydroxy-3-methoxyamfetamin (HMA).
Existují testovací proužky na MDMA / extázi, ale je obtížnější je sehnat. V moči byl nalezen amfetamin a metamfetamin. Vysvětluje se to jejich společnou příslušností ke stejné třídě, a tedy strukturní podobností látek a jejich metabolitů. Váhy THC (kanabinoidy) a OPI (opiáty) se při druhém testu experimentu neúčastní (nejsou aktivovány). Podle levého snímku nejsou tyto látky v souvislosti s užitím MDMA detekovány.
MEFEDRON.
Hlavní metabolity: mefedron, nor-mefedron, 4'-karboxy-mefedron, 1'-dihydro-mefedron, N-succinyl-nor-mefedron.
Zajímavý komentář redakce webu https://www.zoomtesting.co.uk:"Někteří prodejci poukazují na to, že k detekci mefedronu lze použít metamfetaminový test. To je však nesprávné. Chemická struktura pervitinu a mefedronu je odlišná, takže test na metamfetamin nebude platný pro mefedron". Dobrá, pojďme si to ověřit.
Kromě standardních látek byl použit ještě jeden testovací proužek na barbituráty. S tímto testovacím proužkem je zjevně něco v nepořádku. Test zopakoval jiný dobrovolník, který barbituráty ani přípravky s jejich obsahem nikdy neužíval, s podobným výsledkem.
ALPHA-PVP (alfa-pyrrolidinovalerofenon).
Druhá linie v okně PCP téměř zcela chybí.
MARIJUANA.
Hlavní metabolity: tetrahydrokanabinol (THC), 11-hydroxy-THC, 11-nor-9-karboxy-THC. Konopí dobře určitelné a vždy jen ve svém okénku "THC" (tetrahydrokanabinol), stačí prokázat na nejjednodušším testu.
Závěr.
Testy detekují drogy v tělesných tekutinách mnohem déle, než je pociťován jejich psychoaktivní účinek. Jsou poměrně levné, mají dobrou citlivost a jsou jen nepatrně horší než metody používané v laboratoři. Nezapomeňte na svou bezpečnost - pokud bude potřeba zkontrolovat vaši "čistotu" sami, expresní testy budou nepostradatelné.
Last edited by a moderator: