Einleitung.
Das Hauptziel dieser Untersuchung ist die Bewertung der Möglichkeit, die wichtigsten Drogen in biologischen Flüssigkeiten mit öffentlich zugänglichen Expressmethoden zu Hause zu bestimmen. Dieser Artikel gibt Antworten auf folgende Fragen.
- Zeigen Apothekentests für $3-20 wirklich die Tatsache der Verwendung der angegebenen Substanzen an? (Klassische kombinierte Teststreifen enthalten Skalen für die Bestimmung von Amphetamin, Methamphetamin, Kokain, Marihuana, Opiaten).
- Können diese Teststreifen auch für Alpha-PVP und Mephedron nützlich sein? (Es gibt keine speziellen Tests in Apotheken)
Der Grund für die Verwendung der gebräuchlichsten Tests aus der Apotheke, die leicht zu kaufen sind, ist, dass die Forschung hilfreich sein und praktische Anwendung finden soll.
Wichtig: Es können auch andere Lateral-Flow-Tests (LFTs) mit unterschiedlichen Bezeichnungen verwendet werden, wobei die Herstellerfirma keine Rolle spielt, da alle Teststreifen den gleichen Arbeitsmechanismus haben und vergleichbar effektiv sind.
Über LFT.
Lateral-Flow-Tests (LFTs), auch bekannt als immunchromatografische Lateral-Flow-Assays oder Schnelltests, sind einfache Geräte, mit denen das Vorhandensein einer Zielsubstanz in einer flüssigen Probe nachgewiesen werden kann, ohne dass eine spezielle und kostspielige Ausrüstung erforderlich ist. Diese Tests sind in der medizinischen Diagnostik weit verbreitet und können zu Hause, in der Arztpraxis oder im Labor eingesetzt werden. Der Schwangerschaftstest für zu Hause ist beispielsweise ein LFT, der ein bestimmtes Hormon nachweist. Diese Tests sind einfach und kostengünstig und liefern in der Regel in fünf bis 30 Minuten ein Ergebnis. Viele laborgestützte Anwendungen erhöhen die Empfindlichkeit einfacher LFTs durch den Einsatz zusätzlicher spezieller Geräte.
LFTs funktionieren nach denselben Prinzipien wie die enzymatischen Immunoassays (ELISA). Im Wesentlichen wird bei diesen Tests die flüssige Probe an der Oberfläche eines Pads mit reaktiven Molekülen entlanggeführt, die ein visuelles positives oder negatives Ergebnis anzeigen. Die Pads bestehen aus einer Reihe von Kapillarbetten, z. B. aus porösem Papier, mikrostrukturiertem Polymer oder gesintertem Polymer. Jedes dieser Pads hat die Fähigkeit, Flüssigkeit (z. B. Urin, Blut, Speichel) spontan zu transportieren.
Das Probenkissen wirkt wie ein Schwamm und nimmt einen Überschuss an Probenflüssigkeit auf. Nach dem Durchtränken fließt die Flüssigkeit zum zweiten Konjugatkissen, in dem der Hersteller gefriergetrocknete bioaktive Partikel, so genannte Konjugate (siehe unten), in einer Salz-Zucker-Matrix gelagert hat. Das Konjugat-Pad enthält alle Reagenzien, die für eine optimierte chemische Reaktion zwischen dem Zielmolekül (z. B. einem Antigen) und seinem chemischen Partner (z. B. einem Antikörper), der auf der Oberfläche des Partikels immobilisiert wurde, erforderlich sind. Diese Markierungen kennzeichnen die Zielpartikel, wenn sie das Pad passieren und zu den Test- und Kontrolllinien übergehen. Die Testlinie zeigt ein Signal an, oft eine Farbe, wie bei Schwangerschaftstests. Die Kontrolllinie enthält Affinitätsliganden, die anzeigen, ob die Probe durchgeflossen ist und die Biomoleküle im Konjugatpad aktiv sind. Nachdem die Flüssigkeit diese Reaktionszonen passiert hat, gelangt sie in das letzte poröse Material, den Docht, der einfach als Abfallbehälter dient.
LFTs funktionieren nach denselben Prinzipien wie die enzymatischen Immunoassays (ELISA). Im Wesentlichen wird bei diesen Tests die flüssige Probe an der Oberfläche eines Pads mit reaktiven Molekülen entlanggeführt, die ein visuelles positives oder negatives Ergebnis anzeigen. Die Pads bestehen aus einer Reihe von Kapillarbetten, z. B. aus porösem Papier, mikrostrukturiertem Polymer oder gesintertem Polymer. Jedes dieser Pads hat die Fähigkeit, Flüssigkeit (z. B. Urin, Blut, Speichel) spontan zu transportieren.
Das Probenkissen wirkt wie ein Schwamm und nimmt einen Überschuss an Probenflüssigkeit auf. Nach dem Durchtränken fließt die Flüssigkeit zum zweiten Konjugatkissen, in dem der Hersteller gefriergetrocknete bioaktive Partikel, so genannte Konjugate (siehe unten), in einer Salz-Zucker-Matrix gelagert hat. Das Konjugat-Pad enthält alle Reagenzien, die für eine optimierte chemische Reaktion zwischen dem Zielmolekül (z. B. einem Antigen) und seinem chemischen Partner (z. B. einem Antikörper), der auf der Oberfläche des Partikels immobilisiert wurde, erforderlich sind. Diese Markierungen kennzeichnen die Zielpartikel, wenn sie das Pad passieren und zu den Test- und Kontrolllinien übergehen. Die Testlinie zeigt ein Signal an, oft eine Farbe, wie bei Schwangerschaftstests. Die Kontrolllinie enthält Affinitätsliganden, die anzeigen, ob die Probe durchgeflossen ist und die Biomoleküle im Konjugatpad aktiv sind. Nachdem die Flüssigkeit diese Reaktionszonen passiert hat, gelangt sie in das letzte poröse Material, den Docht, der einfach als Abfallbehälter dient.
Es gibt zwei Arten von LFT: die direkte und die kompetitive Methode.
Beim direkten (Sandwich-)LFT wird ein Antikörper-Tag-Konjugat verwendet, das auf eine Konjugatmembran aufgebracht wird. Auf der Testlinie sind für den Analyten spezifische Antikörper immobilisiert, während auf der Kontrolllinie für die primären Antikörper spezifische Anti-Spezies-Antikörper immobilisiert sind. Wenn die Probe, die eine analysierte Substanz enthält, auf den Teststreifen aufgetragen wird und diese Probe auf die Membran mit dem Konjugat trifft, bindet der Analyt an das AT-Tag-Konjugat. Anschließend gelangt der Immunkomplex in die Testzone, wo er sich an spezifische Antikörper bindet und ein "Sandwich" aus Ab-Ag-Ab-Tag bildet. Überschüssiges, nicht gebundenes Konjugat bindet sich an Anti-Spezies-Antikörper auf der Kontrolllinie. Daher bedeuten 2 Linien auf dem Teststreifen ein positives Testergebnis. Befindet sichkeine analysierte Substanz in der Probe, bindet das Konjugat nur an die Anti-Spezies-Antikörper auf der Kontrolllinie und bildet eine Linie auf dem Teststreifen. Die direkte LFT-Methode wird zum Nachweis von Verbindungen mit hohem Molekulargewicht verwendet - Viren, einschließlich HIV, verschiedene Hormone (z. B. in Schwangerschaftstests), Erreger von Infektionskrankheiten.
Die kompetitive LFT-Methode, die für die Bestimmung von Verbindungen mit niedrigem Molekulargewicht verwendet wird, basiert auf dem Wettbewerb zwischen dem Analyten und dem immobilisierten Analyten:Trägerprotein-Konjugat um eine begrenzte Anzahl von Bindungsstellen für spezifische Antikörper, die in dem Ab-Tag-Konjugat enthalten sind. Wenn eine den Analyten enthaltende Probe aufgetragen wird, bindet sie an das AT-Tag-Konjugat auf der Konjugatmembran. Anschließend durchläuft der Immunkomplex die Testzone, in der das Konjugat Analyt/Trägerprotein immobilisiert ist. Der Immunkomplex kann sich aufgrund sterischer Hindernisse nicht an dieses Konjugat binden: Verbindungen mit niedrigem Molekulargewicht haben in der Regel nur eine antigene Determinante, und dementsprechend haben Antikörper nur eine Antigenbindungsstelle, die bereits durch den Analyten besetzt ist. Anschließend wird der Immunkomplex durch Anti-Spezies-Antikörper auf der Kontrolllinie gebunden. Das Fehlen einer farbigen Bande in der Testzone und das Vorhandensein einer Farbe in der Kontrollzone zeigt an, dass die Konzentration des Analyten in der Testprobe den Schwellenwert für diesen Test überschreitet.
Ist kein Analyt in der Probe vorhanden, bindet das Ab-Tag-Konjugat an das Ag:Trägerprotein-Konjugat, das in der Testzone immobilisiert ist. Das ungebundene Ab-Tag-Konjugat gelangt in den Bereich der Kontrolllinie und bindet sich dort mit Anti-Spezies-Antikörpern. Das Vorhandensein von zwei farbigen Linien (Test und Kontrolle) bedeutet also ein negatives Analyseergebnis.
Das kompetitive LFT-Format wird zum Nachweis von niedermolekularen Verbindungen, einschließlich Metaboliten von Narkotika , in Urin, Mundflüssigkeit und Gewebeextrakten verwendet.
Die kompetitive LFT-Methode, die für die Bestimmung von Verbindungen mit niedrigem Molekulargewicht verwendet wird, basiert auf dem Wettbewerb zwischen dem Analyten und dem immobilisierten Analyten:Trägerprotein-Konjugat um eine begrenzte Anzahl von Bindungsstellen für spezifische Antikörper, die in dem Ab-Tag-Konjugat enthalten sind. Wenn eine den Analyten enthaltende Probe aufgetragen wird, bindet sie an das AT-Tag-Konjugat auf der Konjugatmembran. Anschließend durchläuft der Immunkomplex die Testzone, in der das Konjugat Analyt/Trägerprotein immobilisiert ist. Der Immunkomplex kann sich aufgrund sterischer Hindernisse nicht an dieses Konjugat binden: Verbindungen mit niedrigem Molekulargewicht haben in der Regel nur eine antigene Determinante, und dementsprechend haben Antikörper nur eine Antigenbindungsstelle, die bereits durch den Analyten besetzt ist. Anschließend wird der Immunkomplex durch Anti-Spezies-Antikörper auf der Kontrolllinie gebunden. Das Fehlen einer farbigen Bande in der Testzone und das Vorhandensein einer Farbe in der Kontrollzone zeigt an, dass die Konzentration des Analyten in der Testprobe den Schwellenwert für diesen Test überschreitet.
Ist kein Analyt in der Probe vorhanden, bindet das Ab-Tag-Konjugat an das Ag:Trägerprotein-Konjugat, das in der Testzone immobilisiert ist. Das ungebundene Ab-Tag-Konjugat gelangt in den Bereich der Kontrolllinie und bindet sich dort mit Anti-Spezies-Antikörpern. Das Vorhandensein von zwei farbigen Linien (Test und Kontrolle) bedeutet also ein negatives Analyseergebnis.
Das kompetitive LFT-Format wird zum Nachweis von niedermolekularen Verbindungen, einschließlich Metaboliten von Narkotika , in Urin, Mundflüssigkeit und Gewebeextrakten verwendet.
Einfachere Erklärung.
Wenn Sie es nicht verstehen, erkläre ich es noch einfacher. Am Anfang eines jeden Teststreifens befinden sich markierte Antikörper. Aufgrund der Struktur des Teststreifens breitet sich der Urin an ihm entlang aus und trägt die entstandenen Komplexe in den Testbereich, wo die Drogen-Protein-Bänder fixiert sind. Da der Antikörper aus dem angekommenen Immunkomplex bereits von der Droge aus dem Urin aufgenommen wurde, kann er sich nicht in der Testzone anlagern und wandert weiter in die Kontrollzone, wo er sich an den Anti-Spezies-Antikörper bindet und einen Streifen auf der Skala einfärbt (positives Ergebnis).
Befindet sich keine Droge in der Bioprobe, bewegen sich die Antikörper im Urin entlang des Teststreifens und bleiben frei. Wenn der Antikörper-Protein-Komplex im Testbereich zusammentrifft, werden einige markierte Antikörper daran gebunden (der erste Streifen erscheint), der Rest bewegt sich mit dem Urinfluss in den Kontrollbereich, wo er ebenfalls an den Anti-Spezies-Antikörper bindet und den zweiten Streifen markiert (2 Streifen - negatives Ergebnis). Erscheint die Linie in der Testzone, aber nicht in der Kontrollzone (sollte immer erscheinen) - ist der Test fehlerhaft.
Befindet sich keine Droge in der Bioprobe, bewegen sich die Antikörper im Urin entlang des Teststreifens und bleiben frei. Wenn der Antikörper-Protein-Komplex im Testbereich zusammentrifft, werden einige markierte Antikörper daran gebunden (der erste Streifen erscheint), der Rest bewegt sich mit dem Urinfluss in den Kontrollbereich, wo er ebenfalls an den Anti-Spezies-Antikörper bindet und den zweiten Streifen markiert (2 Streifen - negatives Ergebnis). Erscheint die Linie in der Testzone, aber nicht in der Kontrollzone (sollte immer erscheinen) - ist der Test fehlerhaft.
Die Substanzen wurden von Freiwilligen verwendet, die über einen ausreichenden Zeitraum keine psychoaktiven Substanzen eingenommen hatten; für die Analyse wurde Urin entnommen. Hier sind die Ergebnisse des Experiments.
Experimente.
AMPHETAMINHauptmetaboliten: Amphetamin, 4-Hydroxyamphetamin, 4-Hydroxynorephedrin, 4-Hydroxyphenylaceton, Benzoesäure, Hippursäure, Norephedrin, Phenylaceton.
COCAIN.
Hauptmetaboliten: Benzoylecgonin, Ecgoninmethylester, Ecgonin, Norcocain, p-Hydroxycain, m-Hydroxycain, p-Hydroxybenzoylecgonin, m-Hydroxybenzoylecgonin.
Wenn Sie sich den Test auf der rechten Seite ansehen, können Sie erkennen, warum die Teststreifen mit einem kritischen Blick zu behandeln sind. Die getestete Person hat in letzter Zeit keine PAS konsumiert, mit Ausnahme von Kokain.
HEROIN.
Wichtigste Stoffwechselprodukte: Morphin, Normorphin, Hydromorphon.
MDMA / ECSTASY.
Hauptmetaboliten: 3,4-Methylendioxymethamphetamin (MDMA), 3,4-Methylendioxyamphetamin (MDA), 4-Hydroxy-3-methoxymethamphetamin (HMMA), 4-Hydroxy-3-methoxyamphetamin (HMA).
Es gibt auch MDMA/Ecstasy-Teststreifen, die jedoch schwieriger zu finden sind. Amphetamin und Methamphetamin wurden im Urin nachgewiesen. Dies erklärt sich aus ihrer gemeinsamen Zugehörigkeit zur gleichen Klasse und dementsprechend aus der strukturellen Ähnlichkeit der Substanzen und ihrer Metaboliten. Die Skalen THC (Cannabinoide) und OPI (Opiate) des zweiten Tests nehmen nicht am Experiment teil (nicht aktiviert). Laut dem linken Foto werden diese Substanzen nicht in Verbindung mit dem Konsum von MDMA nachgewiesen.
MEPHEDRON.
Hauptmetaboliten: Mephedron, Nor-Mephedron, 4'-Carboxy-Mephedron, 1'-Dihydro-Mephedron, N-Succinyl-Nor-Mephedron.
Ein interessanter Kommentar der Redakteure der Website https://www.zoomtesting.co.uk: "Einige Anbieter weisen darauf hin, dass ein Methamphetamin-Test zum Nachweis von Mephedron verwendet werden kann. Dies ist jedoch falsch. Die chemische Struktur von Meth und Meph ist unterschiedlich, so dass der Methamphetamin-Test nicht für Mephedron gilt. Nun, sehen wir uns das mal an.
Zusätzlich zu den Standardsubstanzen wurde ein weiterer Teststreifen zum Nachweis von Barbituraten verwendet. Mit diesem Teststreifen ist eindeutig etwas nicht in Ordnung. Der Test wurde von einem anderen Probanden wiederholt, der noch nie Barbiturate oder barbiturathaltige Präparate konsumiert hatte, mit einem ähnlichen Ergebnis.
ALPHA-PVP (alpha-Pyrrolidinovalerophenon).
Die zweite Linie im PCP-Fenster fehlt fast vollständig.
MARIJUANA.
Hauptmetaboliten: Tetrahydrocannabinol (THC), 11-Hydroxy-THC, 11-Nor-9-Carboxy-THC. Cannabis gut bestimmt und immer nur in seinem Fenster "THC" (Tetrahydrocannabinol), ist es genug, um auf dem einfachsten Test zu demonstrieren.
Schlussfolgerung.
Tests weisen Drogen in Körperflüssigkeiten schon viel länger nach, als ihre psychoaktive Wirkung zu spüren ist. Sie sind recht billig, haben eine gute Empfindlichkeit und sind den im Labor verwendeten Methoden nur geringfügig unterlegen. Denken Sie an Ihre Sicherheit - wenn Sie Ihre "Sauberkeit" selbst überprüfen müssen, sind Eiltests unverzichtbar.
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