Auswirkungen der Indol-3-Lactat-Supplementierung in Tiermodellen für Multiple Sklerose
Ich fange bei Null an, mit grundlegenden Kenntnissen der Buschmechanik.
Es gibt nicht viel, was ich mit genügend Zeit nicht tun könnte, aber das ist das Problem bei degenerativen Krankheiten.
Wie Sie wissen, ist es schwierig, Informationen von Medizinern oder Chemielieferanten zu erhalten.
Ich will leben.
Ich behaupte nicht, dass dies von Wert ist, aber vielleicht können Sie mir helfen, mehr zu verstehen.
Das Beste, was ich bisher gefunden habe, sind die Angaben auf den Seiten der Chemielieferanten:
Wie wird die Stammlösung hergestellt?
Bitte wählen Sie ein geeignetes Lösungsmittel, um die konzentrierte Stammlösung entsprechend den Anforderungen des Experiments herzustellen. Informationen zur Löslichkeit finden Sie auf der Produktseite unserer Website. Für In-vitro-Experimente wird häufig DMSO als Lösungsmittel verwendet.
Die Stammlösung wird dann verdünnt, um eine Arbeitslösung herzustellen (z. B. 1:1000 Verdünnung in Zellkulturmedium).
Nachfolgend einige Empfehlungen für das Auflösen des Produkts:
(1) Berechnen Sie die Konzentration der Stammlösung nach der folgenden Formel neu: Tatsächliche Konzentration (mg/ml) = Molekulargewicht (g/mol) x Konzentration (mM) x 10-3
(2) Überprüfen Sie, ob das Lösungsmittel verunreinigt wurde, z. B. absorbiert DMSO Feuchtigkeit.
(3) Einige Verbindungen sind aufgrund ihrer Struktur und ihrer chemischen Eigenschaften schwer zu lösen und erfordern möglicherweise zusätzliches Mischen, z. B. durch Vortexen oder Ultraschallbehandlung. Erforderlichenfalls kann auch das Erhitzen der Verbindung den Auflösungsprozess unterstützen. Denken Sie jedoch daran, die Verbindung nicht über 45℃ zu erhitzen, um eine Veränderung des Produkts zu vermeiden.
Wie ist das Produkt zu lagern?
Bei -20℃ oder -80℃ lagern Aliquotieren Sie die Stammlösung auf Routineverbrauchsmengen und lagern Sie sie bei -20℃ oder -80℃. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden.
Wie wird die Arbeitslösung hergestellt?
(1) Berechnen Sie die erforderliche Verdünnung mit Hilfe unseres Verdünnungsrechners.
(2) Geben Sie die Stammlösung langsam in das Lösungsmittel, bis die gewünschte Konzentration erreicht ist.
Mischen Sie durch Vortexen oder wiederholtes Pipettieren.
(3) Falls in der Arbeitslösung ein Niederschlag vorhanden ist, lassen Sie die Arbeitslösung 10 Minuten lang stehen, mischen Sie mit dem Vortexer oder der Pipette und überprüfen Sie dann erneut.
(4) Unsere Verbindungen sind meist fettlöslich. Beim Verdünnen mit wässrigen Lösungsmitteln wie Zellkulturmedium oder PBS können Ausfällungen auftreten. Eine vollständige Auflösung kann durch Ultraschall erreicht werden.
Worauf muss ich bei zellbasierten Assays achten?
Bei den meisten zellbasierten Assays wird DMSO zur Herstellung der Stammlösung verwendet. Die Stammlösung wird mit dem Kulturmedium verdünnt, um eine Arbeitslösung herzustellen. Achten Sie darauf, dass die DMSO-Konzentration <=0,1 % ist, um eine Vergiftung der Zellen zu vermeiden. In der Regel ist die Negativkontrolle im Experiment das Kulturmedium mit DMSO in der gleichen Konzentration.
Worauf muss ich bei Tierversuchen achten?
(1) Unsere Verbindungen sind meist fettlöslich. Wenn DMSO zur Herstellung der Stammlösung verwendet und dann verdünnt wird, um die Arbeitslösung für Tierversuche herzustellen, ist es möglicherweise nicht möglich, die erforderlichen Dosen zu erhalten. Stattdessen werden hydrotrope Mittel wie Natriumcarboxymethylcellulose (CMC-Na), Tween 80 oder Glycerin benötigt.
Ein Beispiel: Um die für eine Maus verwendete Dosis (20m/kg) in die für ein 1,5 kg schweres Kaninchen verwendete Dosis umzurechnen:
Gruppe A Tier: Maus; Gruppe B Tier: Kaninchen;
Umrechnungskoeffizient:
0,37 Die für das Kaninchen verwendete Dosis wäre 1,5kg*(0,37*20mg/kg) =11,1mg.