Επίδραση της συμπλήρωσης γαλακτικού ινδολίου 3 σε ζωικά μοντέλα σκλήρυνσης κατά πλάκας
Ξεκινάω από το μηδέν με βασικές δεξιότητες μηχανικού μπούσουλα.
Δεν υπάρχουν πολλά που δεν μπορώ να κάνω με αρκετό χρόνο, αλλά αυτό είναι το θέμα με την εκφυλιστική ασθένεια.
Όπως γνωρίζετε, είναι δύσκολο να λάβετε πληροφορίες από τον ιατρικό κλάδο ή τους προμηθευτές χημικών ουσιών.
Θέλω να ζήσω.
Δεν ισχυρίζομαι ότι αυτό έχει αξία, αλλά ίσως μπορείτε να με βοηθήσετε να καταλάβω περισσότερα.
Το καλύτερο που έχω βρει μέχρι στιγμής είναι τα δεδομένα στις ιστοσελίδες των προμηθευτών χημικών ουσιών:
Πώς να προετοιμάσετε το διάλυμα αποθέματος;
Παρακαλώ επιλέξτε έναν κατάλληλο διαλύτη για την παρασκευή του συμπυκνωμένου αποθέματος διαλύματος σύμφωνα με τις απαιτήσεις του πειράματος. Πληροφορίες για τη διαλυτότητα μπορείτε να βρείτε στη σελίδα του προϊόντος στον ιστότοπό μας. Για πειράματα in vitro, χρησιμοποιείται συχνά ως διαλύτης το DMSO.
Το βασικό διάλυμα αραιώνεται στη συνέχεια για να παραχθεί ένα διάλυμα εργασίας (π.χ. αραίωση 1:1000 σε μέσο κυτταροκαλλιέργειας).
Ακολουθούν ορισμένες συστάσεις για τη διάλυση του προϊόντος:
(1) Υπολογίστε εκ νέου τη συγκέντρωση του βασικού διαλύματος σύμφωνα με τον ακόλουθο τύπο: Πραγματική συγκέντρωση (mg/mL) = Μοριακό βάρος (g/mol) x συγκέντρωση (mM) x 10-3
(2) Ελέγξτε αν ο διαλύτης έχει μολυνθεί,π.χ. το DMSO απορροφά υγρασία.
(3) Ορισμένες ενώσεις είναι δύσκολο να διαλυθούν λόγω της δομής και των χημικών χαρακτηριστικών τους και ενδέχεται να απαιτείται πρόσθετη ανάμιξη, όπως στροβιλισμός ή υπερήχοι. Όταν είναι απαραίτητο, η θέρμανση της ένωσης μπορεί επίσης να βοηθήσει στη διαδικασία διάλυσης. Θυμηθείτε όμως να μην θερμαίνετε την ένωση πάνω από 45 ℃ για να αποφύγετε την αλλοίωση του προϊόντος.
Πώς να αποθηκεύσετε το προϊόν;
Αποθηκεύστε σε -20℃ ή -80℃ Αποκλείεται να διαλύσετε το διάλυμα αποθέματος σε όγκους συνήθους χρήσης και να το αποθηκεύσετε σε -20℃ ή -80℃ . Αποφύγετε την επανειλημμένη κατάψυξη και απόψυξη.
Πώς να προετοιμάσετε το διάλυμα εργασίας;
(1) Υπολογίστε την απαιτούμενη αραίωση χρησιμοποιώντας τον υπολογιστή αραίωσης.
(2) Προσθέστε αργά το βασικό διάλυμα στον διαλύτη μέχρι να επιτευχθεί η επιθυμητή συγκέντρωση.
Ανακατέψτε με vortex ή επαναλαμβανόμενη πιπετοποίηση.
(3) Εάν υπάρχει κατακρήμνιση στο διάλυμα εργασίας, αφήστε το διάλυμα εργασίας να σταθεί για 10 λεπτά,αναμείξτε με vortex ή πιπέτα και στη συνέχεια ελέγξτε εκ νέου.
(4) Οι ενώσεις μας είναι ως επί το πλείστον λιποδιαλυτές. Μπορεί να υπάρχει κατακρήμνιση όταν αραιώνονται με τη χρήση υδατικών διαλυτών, όπως μέσο κυτταροκαλλιέργειας ή PBS Πλήρης διάλυση μπορεί να επιτευχθεί με υπερήχους.
Τι πρέπει να προσέξω για δοκιμασίες με βάση κύτταρα;
Το DMSO χρησιμοποιείται για την παρασκευή του βασικού διαλύματος στις περισσότερες δοκιμασίες με βάση τα κύτταρα. Το διάλυμα αποθέματος αραιώνεται στο μέσο καλλιέργειας για την παρασκευή διαλύματος εργασίας. Βεβαιωθείτε ότι η συγκέντρωση του DMSO είναι <=0,1% για να αποφύγετε τη δηλητηρίαση των κυττάρων Συνήθως, ο αρνητικός έλεγχος στο πείραμα είναι το μέσο καλλιέργειας με DMSO στην ίδια συγκέντρωση.
Τι πρέπει να προσέξω για τα πειράματα σε ζώα;
(1) Οι ενώσεις μας είναι ως επί το πλείστον λιποδιαλυτές. Εάν χρησιμοποιηθεί DMSO για την παρασκευή του stock solution και στη συνέχεια αραιωθεί για την παρασκευή του διαλύματος εργασίας για πειράματα σε ζώα, ενδέχεται να μην είναι δυνατή η λήψη των απαιτούμενων δόσεων. Αντ' αυτού, απαιτούνται υδροτροπικοί παράγοντες, όπως καρβοξυμεθυλοκυτταρίνη νατρίου (CMC-Na), Tween 80 ή γλυκερίνη.
Για παράδειγμα, για τη μετατροπή της δόσης που χρησιμοποιείται σε ποντίκι(20m/kg) στη δόση που χρησιμοποιείται για κουνέλι βάρους 1,5kg:
Ομάδα Α Ζώο: ποντίκι- Ομάδα Β Ζώο: ποντίκι: Κουνέλι,
Συντελεστής μετατροπής:
0,37 Η δόση που χρησιμοποιείται στο κουνέλι θα ήταν 1,5kg*(0,37*20mg/kg) =11,1mg.
