Johdanto.
Tässä aiheessa luon katsauksen eräisiin tärkeisiin laboratoriotekniikoihin. Näiden toimintojen hyödyllistä ja hyödyllistä merkitystä on vaikea yliarvioida. Dekantointi, painovoimainen suodatus ja nesteen siirtäminen ovat yksinkertaisia, mutta vaativat hieman huomiota ja laboratoriotaitoja. Niiden harjoittelu on paras tapa oppia käyttäytymään laboratoriossa ja tekemään yksinkertaisimmat käsittelyt. Sen jälkeen voit tutustua monimutkaisempiin aiheisiin, kuten imusuodatukseen, uudelleenkiteytykseen ja kuumasuodatukseen, ja lopuksi tislaukseen ja tislausjärjestelmiin. Jos sinulla on vähän laboratoriotietämystä ja sinulla on ongelmia lasitavaroiden nimien kanssa tässä tai edellä linkitetyissä teemoissa, voit käyttää tätä aihetta vinkkinä.
Dekantointi.
Kun kiinteän ja nestemäisen seoksen erottaminen on tarpeen, on toisinaan mahdollista kaataa neste pois ja jättää kiinteä aine jäljelle. Tätä prosessia kutsutaan dekantoimiseksi, ja se on yksinkertaisin erotusmenetelmä. Dekantointia käytetään usein hydratoidun natriumsulfaatin (Na2SO4) poistamiseen orgaanisesta liuoksesta. Natriumsulfaatti tarttuu usein lasitavaraan (kuva 1 a), jolloin neste voidaan kaataa pois (kuva 1 b). Jos neste halutaan kaataa pieneen astiaan, voidaan käyttää suppiloa tai kaataa nestettä lasista sekoitussauvaa pitkin virtauksen ohjaamiseksi (kuva 1 c). Valitettavasti on monia seoksia, jotka eivät dekantoitu hyvin.
Dekantointi on prosessi, jossa seoksen komponentit erotetaan toisistaan tiheyserojen perusteella. Dekantointiin voi törmätä jokapäiväisessä elämässä viinin tai väkevien alkoholijuomien kanssa, mutta se on myös tehokas tekniikka kemiassa, kun halutaan erottaa kiinteä aine nesteestä tai eristää kaksi sekoittumatonta nestettä. Dekantointi on helppoa, mutta sen haittapuolena on, että seoksen komponentit eivät erotu täydellisesti toisistaan. Pieni määrä yhtä komponenttia häviää toista komponenttia kerättäessä, tai sitten keräys menee liian pitkälle ja keräys kontaminoituu toisella komponentilla.
Miten dekantointi toimii.
Dekantointiin kuuluu kaksi vaihetta.
Miten dekantointi toimii.
Dekantointiin kuuluu kaksi vaihetta.
- Laskeutuminen: Sedimentoinnissa käytetään painovoimaa tai sentrifugia seoksen komponenttien erottamiseen tiheyden perusteella.
- Dekantointi: Dekantointi tarkoittaa seoksen ylimmän komponentin kaatamista tai siivilöimistä tai alimman komponentin tyhjentämistä.
Kiinteää komponenttia kutsutaan "sedimentiksi" (tai "pelletiksi", kun käytetään sentrifugointia). Kerättyä nestemäistä komponenttia kutsutaan "dekantiksi".
Dekantoinnin perusperiaate on, että raskaammat (tiheämmät) aineet uppoavat, kun taas kevyemmät (vähemmän tiheät) aineet kelluvat. Yksinkertaisimmillaan dekantointi käyttää painovoimaa kiinteän aineen ja nesteen tai kahden sekoittumattoman nesteen erottamiseen toisistaan. Kevyempi komponentti kaadetaan tai siivilöidään pois seoksen pinnalta. Vaihtoehtoisesti raskaampi komponentti valutetaan erotussuppilolla.
Pienet tilavuudet dekantoidaan käyttämällä koeputkia, jotka on kallistettu 45 asteen kulmaan koeputkitelineessä. Kulman ansiosta raskaammat hiukkaset liukuvat putkea pitkin alaspäin, kun taas kevyemmät hiukkaset nousevat putken yläosaan. Kulma helpottaa myös kevyemmän komponentin kaatamista. Nesteen kaataminen on helpompaa, jos se kaadetaan sekoitustankoa pitkin. Dekantointiprosessi on hitaampi, jos koeputkia pidetään pystysuorassa, koska raskaampi komponentti voi muodostaa tulpan ja estää kevyempien hiukkasten nousun.
Sentrifugointi nopeuttaa dekantointia käyttämällä keskipakovoimaa ja keskipakovoimaa. Periaatteessa keinotekoinen painovoima erottaa seoksen komponentit nopeammin. Sentrifugointi tiivistää kiinteät komponentit pelletiksi. Kun neste kaadetaan pois pelletistä, hävikki on pienempi kuin yksinkertaisessa dekantoinnissa. Erotussuppilolla dekantoidaan sekoittumattomien nesteiden seosten komponentit. Yksi komponentti kelluu toisen päällä. Suppilo tyhjentää suppilon pohjalle jäävän komponentin.
Pienet tilavuudet dekantoidaan käyttämällä koeputkia, jotka on kallistettu 45 asteen kulmaan koeputkitelineessä. Kulman ansiosta raskaammat hiukkaset liukuvat putkea pitkin alaspäin, kun taas kevyemmät hiukkaset nousevat putken yläosaan. Kulma helpottaa myös kevyemmän komponentin kaatamista. Nesteen kaataminen on helpompaa, jos se kaadetaan sekoitustankoa pitkin. Dekantointiprosessi on hitaampi, jos koeputkia pidetään pystysuorassa, koska raskaampi komponentti voi muodostaa tulpan ja estää kevyempien hiukkasten nousun.
Sentrifugointi nopeuttaa dekantointia käyttämällä keskipakovoimaa ja keskipakovoimaa. Periaatteessa keinotekoinen painovoima erottaa seoksen komponentit nopeammin. Sentrifugointi tiivistää kiinteät komponentit pelletiksi. Kun neste kaadetaan pois pelletistä, hävikki on pienempi kuin yksinkertaisessa dekantoinnissa. Erotussuppilolla dekantoidaan sekoittumattomien nesteiden seosten komponentit. Yksi komponentti kelluu toisen päällä. Suppilo tyhjentää suppilon pohjalle jäävän komponentin.
Suodatusmenetelmät.
Kiinteää ainetta ja nestettä sisältävän seoksen erottamiseen käytetään monia menetelmiä. Jos kiinteä aine laskeutuu hyvin, neste voidaan joskus kaataa pois (dekantoida). Jos kiinteässä aineessa on hyvin pienikokoisia hiukkasia tai se muodostaa samean seoksen, seos voidaan joskus sentrifugoida tai se voidaan johtaa suodatinpipetin läpi (mikroskoopissa, < 5 ml). Yleisimmät kiinteän ja nestemäisen aineen erottelumenetelmät orgaanisessa laboratoriossa ovat painovoima ja imusuodatus. Painovoimasuodatuksella tarkoitetaan kiinteän ja nestemäisen seoksen kaatamista suodatinpaperia sisältävän suppilon läpi, jolloin neste pääsee tihkumaan sen läpi ja kiinteä aine jää paperiin (kuva 1 a). Imusuodatus on samankaltainen prosessi, jonka erona on, että suppilon alla on alipaine, joka vetää nesteen suodatinpaperin läpi imun avulla (kuva 1 b).
Painovoimasuodatuksella ja imusuodatuksella on hyvät ja huonot puolensa, mutta yleensä ratkaisevaa on se, halutaanko kiinteä aine vai suodos pidättää. "Suodoksella" tarkoitetaan suodatinpaperin läpi kulkenutta nestettä (kuten kuvassa 1 a on esitetty). Painovoimasuodatusta käytetään yleensä silloin, kun suodos pidätetään, kun taas imusuodatusta käytetään silloin, kun kiinteä aine pidätetään. Painovoimasuodatusta käytetään mieluummin silloin, kun suodos pidätetään, koska imu voi vetää pieniä kiinteitä hiukkasia suodatinpaperin huokosten läpi, jolloin suodos voi olla kiinteän yhdisteen saastuttama. Imusuodatus on suositeltavampaa, kun kiinteä aine on pidätetty, koska painovoimasuodatus on paljon tehottomampi poistamaan jäännösnestettä suodatinpaperilla olevasta kiinteästä aineesta.
Painovoimainen suodatus.
Kun kiinteän ja nestemäisen seoksen erottaminen on tarpeen, on tavallista, että hiukkaset ovat niin hienoja, että ne pyörivät ja hajoavat, kun kolvia kallistetaan. Tällaisia seoksia ei voida dekantoida, ja vaihtoehtoinen menetelmä on painovoimasuodatus. Painovoimasuodatusta käytetään yleensä silloin, kun suodos (suodatinpaperin läpi mennyt neste) jää suodatukseen, kun taas suodatinpaperilla oleva kiinteä aine hävitetään. Painovoimasuodatusta käytetään yleisesti vedettömän magnesiumsulfaatin (MgSO4) erottamiseen orgaanisesta liuoksesta, jonka se on kuivannut (kuva b). Vedetön magnesiumsulfaatti on jauhemaista, ja kun sitä pyöritellään orgaanisessa liuottimessa, syntyy hienojakoinen hiukkasten hajonta, joka muistuttaa lumipalloa.
Seoksen painovoimasuodattamiseksi seos kaadetaan suppilossa olevan nelikulmaisesti taitetun suodatinpaperin (kuva 4) tai uritetun suodatinpaperin läpi ja nesteen annetaan suodattua pelkästään painovoiman avulla (kuva 3 c). On parasta kaataa niin kuin yrittäisi dekantoida, eli pitää kiinteä aine laskeutuneena kolviin mahdollisimman pitkään. Kun kiintoainetta alkaa valua suodatinpaperille, se voi tukkia suodatinpaperin huokoset tai hidastaa suodatusta. Kun suodatus on päättynyt, huuhtele suodatinpaperilla (ja kolvissa) oleva kiintoaine muutamalla annoksella tuoretta liuotinta, jotta kiintoaineeseen tarttuneet yhdistejäämät saadaan poistettua.
.
Nesteiden siirtäminen.
Nesteiden kaataminen.Kun siirretään nesteitä, joiden tilavuus on yli 5 ml, ne voidaan kaataa suoraan astioihin. Mittalieriöissä ja dekantterilaseissa on suussaan syvennys, joten niitä voidaan kaataa hallitusti, kunhan kaksi lasinpalaa koskettaa toisiaan (kuva 5 a). Jos kaadetaan Erlenmeyer-pullosta tai siirretään nestettä astiaan, jossa on kapea suu (esim. pyöreäpohjainen pullo), on käytettävä suppiloa. Suppiloita voidaan pitää tukevasti kiinni rengaspuristimella (kuva 5 b) tai pitää kiinni toisella kädellä samalla kun kaadetaan toisella (kuva 5 c).
Mittauksia koskevat huomautukset.
Jotta kemiallisen reaktion saanto voitaisiin määrittää, on tärkeää, että rajana oleva reaktantti on mitattu tarkasti. Tarkkuus ei ole yhtä tärkeää, kun käsitellään ylimääräistä reagenssia, varsinkin jos reagenssia on moninkertainen määrä.
Osa mittapullolla mitatusta nesteestä tarttuu aina lasitavaraan kaatamisen jälkeen, mikä tarkoittaa, että todellinen annosteltu tilavuus ei koskaan vastaa mittapullon merkintöjä. Siksi mittasylintereitä voidaan käyttää liuottimien tai ylimääräisten nesteiden annosteluun, kun taas tarkempia menetelmiä (esim. massaa, kalibroituja pipettejä tai ruiskuja) olisi käytettävä annosteltaessa tai mitattaessa rajoittavaa reagoivaa ainetta. Mittapulloa voidaan käyttää rajoittavan reagoivan aineen annosteluun, jos myöhemmin määritetään massa, jotta saadaan selville tarkka tosiasiallisesti annosteltu määrä.
Osa mittapullolla mitatusta nesteestä tarttuu aina lasitavaraan kaatamisen jälkeen, mikä tarkoittaa, että todellinen annosteltu tilavuus ei koskaan vastaa mittapullon merkintöjä. Siksi mittasylintereitä voidaan käyttää liuottimien tai ylimääräisten nesteiden annosteluun, kun taas tarkempia menetelmiä (esim. massaa, kalibroituja pipettejä tai ruiskuja) olisi käytettävä annosteltaessa tai mitattaessa rajoittavaa reagoivaa ainetta. Mittapulloa voidaan käyttää rajoittavan reagoivan aineen annosteluun, jos myöhemmin määritetään massa, jotta saadaan selville tarkka tosiasiallisesti annosteltu määrä.
Kun astian massaa määritetään vaa'alla, on parasta jättää korkkirenkaan (kuva 6 a) tai muun tuen (esim. dekantterilasi kuvassa 6 b) massa huomioimatta. Korkkirengas saattaa kastua, sen päälle voi valua reagensseja tai siitä voi pudota korkinpaloja, jolloin massa muuttuu, eikä sitä voida ottaa huomioon. Laseja, joita käytetään kolvien tukena, voi sekoittua keskenään, eikä kaikilla 100 ml:n laseilla ole samaa massaa. Kemikaaleja sisältävät astiat on myös parasta kuljettaa vaa'alle suljetuissa astioissa, jotta höyryt saadaan minimoitua ja mahdolliset vuodot kuljetuksen aikana estettyä.
Pasteur-pipettien käyttö.
Pasteur-pipetit (tai pipetit) ovat yleisimmin käytetty väline pienten nestemäärien (< 5 ml) siirtämiseen astiasta toiseen. Niitä pidetään kertakäyttöisinä, vaikka jotkin laitokset voivat puhdistaa ja käyttää niitä uudelleen, jos niillä on menetelmä, jolla estetään hauraiden kärkien rikkoutuminen.
Pasteur-pipettien käyttö.
Pasteur-pipetit (tai pipetit) ovat yleisimmin käytetty väline pienten nestemäärien (< 5 ml) siirtämiseen astiasta toiseen. Niitä pidetään kertakäyttöisinä, vaikka jotkin laitokset voivat puhdistaa ja käyttää niitä uudelleen, jos niillä on menetelmä, jolla estetään hauraiden kärkien rikkoutuminen.
Pasteur-pipettejä on kahta kokoa (kuva 7 a): lyhyitä (5,75") ja pitkiä (9"). Kumpaankin mahtuu noin 1,5 ml nestettä, mutta annosteltava määrä riippuu tippapipetin polttimon koosta. Yleinen ohje, jonka mukaan "1 ml vastaa 20 tippaa", ei aina päde Pasteur-pipetteihin, ja se voi olla epäjohdonmukainen eri pipettien välillä. Tiettyyn pipettiin ja liuokseen sopiva pisarasuhde voidaan määrittää laskemalla pisaroita, kunnes mittalasiin on kertynyt 1 ml. Vaihtoehtoisesti pipetti voidaan kalibroida karkeasti ottamalla 1 ml nestettä mittasylinteristä ja merkitsemällä tilavuusviiva pysyvällä tussilla (kuva 7 b).
Jos haluat käyttää pipettiä, kiinnitä tippaletku ja aseta pipetin kärki nesteeseen. Purista ja vapauta sitten polttimo imun aikaansaamiseksi, jolloin neste vetäytyy pipettiin (kuva 8 a ja b). Pidä pipetti pystysuorassa, vie se pullon luo, johon aine siirretään, ja aseta pipetin kärki pullon liitoskohdan alapuolelle, mutta älä kosketa sen reunoja, ennen kuin painat polttimoa, jotta aine pääsee pulloon (kuva 7 c). Lämppäriä voidaan puristaa muutaman kerran sen jälkeen, jotta pipetistä jäänyt neste saadaan "puhallettua" ulos.
Jos vastaanottavassa pullossa on hiottu lasiliitos, pipetin kärjen on oltava liitoksen alapuolella, jotta neste ei roisku liitoksen päälle, mikä joskus aiheuttaa kappaleiden jäätymisen yhteen liitettäessä. Jos pipetti on tarkoitettu uudelleenkäytettäväksi (esimerkiksi se on reagenssipullon pipetti), pipetti on pidettävä niin, ettei se kosketa lasitavaraa, jolloin se voi kontaminoitua pullossa olevista muista reagensseista (kuva 7 d).
Jos vastaanottavassa pullossa on hiottu lasiliitos, pipetin kärjen on oltava liitoksen alapuolella, jotta neste ei roisku liitoksen päälle, mikä joskus aiheuttaa kappaleiden jäätymisen yhteen liitettäessä. Jos pipetti on tarkoitettu uudelleenkäytettäväksi (esimerkiksi se on reagenssipullon pipetti), pipetti on pidettävä niin, ettei se kosketa lasitavaraa, jolloin se voi kontaminoitua pullossa olevista muista reagensseista (kuva 7 d).
Kalibroitujen pipettien käyttö.
Kalibroidut muovipipetit.Kun tarvitaan tarkkuutta pienten nestemäärien (1-2 ml) annostelussa, mittasylinteri ei ole ihanteellinen, koska kaataminen aiheuttaa merkittävää materiaalihävikkiä. Kalibroiduissa muovipipeteissä on merkinnät 0,25 ml:n välein 1 ml:n pipetille, ja ne ovat taloudellisia tapoja annostella suhteellisen tarkkoja määriä.
Kalibroidun muovipipetin käyttämiseksi nosta hieman siirrettävää nestettä polttimoon tavalliseen tapaan (kuva 9 b). Purista sitten lamppua juuri sen verran, että neste valuu haluttuun tilavuuteen (kuva 9 c), ja pysy paikallasi. Pidä samalla painettuna niin, että nestettä valuu edelleen haluttuun tilavuuteen, siirrä pipetti nopeasti siirtopulloon (kuva 9 d) ja paina edelleen painettuna, jotta nestettä valuu pulloon (kuva 9 e).
Kalibroidut lasipipetit.
Kun nesteiden annostelussa tarvitaan suurta tarkkuutta, voidaan käyttää kalibroituja lasipipettejä (tilavuuspipettejä tai mittauspipettejä). Tilavuuspipeteissä on kaulan yläosassa lasikupu, ja ne pystyvät annostelemaan vain tietyn tilavuuden (esimerkiksi kuvassa 10 oleva ylin pipetti on 10,00 ml:n pipetti). Mittapipeteissä (Mohr-pipetit) on merkinnät, joiden avulla ne voivat antaa useita tilavuuksia. Molemmat pipetit on liitettävä pipettipulloon imun aikaansaamiseksi.
Kalibroidut lasipipetit.
Kun nesteiden annostelussa tarvitaan suurta tarkkuutta, voidaan käyttää kalibroituja lasipipettejä (tilavuuspipettejä tai mittauspipettejä). Tilavuuspipeteissä on kaulan yläosassa lasikupu, ja ne pystyvät annostelemaan vain tietyn tilavuuden (esimerkiksi kuvassa 10 oleva ylin pipetti on 10,00 ml:n pipetti). Mittapipeteissä (Mohr-pipetit) on merkinnät, joiden avulla ne voivat antaa useita tilavuuksia. Molemmat pipetit on liitettävä pipettipulloon imun aikaansaamiseksi.
.
Mittapipetissä olevat tilavuusmerkinnät ilmaisevat toimitetun tilavuuden, mikä saattaa aluksi vaikuttaa hieman "takaperoiselta". Esimerkiksi kun asteikkopipetti pidetään pystysuorassa, korkein merkintä on 0,0 ml, mikä osoittaa, että mitään tilavuutta ei ole annettu, kun pipetti on vielä täynnä. Kun nestettä valutetaan astiaan, pipetin tilavuusmerkinnät kasvavat, ja alin merkintä on usein pipetin kokonaistilavuus (esim. 1,0 ml 1,0 ml:n pipetissä).
Mittapipeteillä voidaan annostella mitä tahansa nestemäärää, mikä on mahdollista tilavuusmerkintöjen erojen ansiosta. Esimerkiksi 1,0 ml:n pipettiä voidaan käyttää 0,4 ml:n nestemäärän antamiseen: a) Nostamalla nestettä 0,0 ml:n merkkiin, tyhjentämällä ja antamalla nestettä 0,4 ml:n merkkiin tai b) Nostamalla nestettä 0,2 ml:n merkkiin ja tyhjentämällä ja antamalla nestettä 0,6 ml:n merkkiin (tai mikä tahansa yhdistelmä, jossa tilavuuksien ero on 0,4 ml).
On tärkeää tarkastella huolellisesti mittapipetin merkintöjä. Kolme erilaista 1 ml:n pipettiä on esitetty kuvassa 11 a. Vasemmanpuoleisimmassa pipetissä on merkinnät 0,1 ml:n välein, mutta siinä ei ole välimerkintöjä, joten se on epätarkempi kuin kaksi muuta kuvassa 11 a esitettyä pipettiä. Keskimmäisen pipetin alin merkintä on 1 ml, kun taas oikeanpuoleisimman pipetin alin merkintä on 0,9 ml. Jotta keskimmäisellä pipetillä voidaan antaa 1,00 ml, neste on valutettava 0,00 ml:n merkistä 1,00 ml:n merkkiin, ja viimeinen senttimetri nestettä on säilytettävä. Jotta oikeanpuoleisimmalla pipetillä voidaan antaa 1,00 ml, neste on valutettava 0,00 ml:n merkistä kokonaan ulos kärjestä, ja tarkoituksena on antaa koko kapasiteetti.
Mittapipeteillä voidaan annostella mitä tahansa nestemäärää, mikä on mahdollista tilavuusmerkintöjen erojen ansiosta. Esimerkiksi 1,0 ml:n pipettiä voidaan käyttää 0,4 ml:n nestemäärän antamiseen: a) Nostamalla nestettä 0,0 ml:n merkkiin, tyhjentämällä ja antamalla nestettä 0,4 ml:n merkkiin tai b) Nostamalla nestettä 0,2 ml:n merkkiin ja tyhjentämällä ja antamalla nestettä 0,6 ml:n merkkiin (tai mikä tahansa yhdistelmä, jossa tilavuuksien ero on 0,4 ml).
On tärkeää tarkastella huolellisesti mittapipetin merkintöjä. Kolme erilaista 1 ml:n pipettiä on esitetty kuvassa 11 a. Vasemmanpuoleisimmassa pipetissä on merkinnät 0,1 ml:n välein, mutta siinä ei ole välimerkintöjä, joten se on epätarkempi kuin kaksi muuta kuvassa 11 a esitettyä pipettiä. Keskimmäisen pipetin alin merkintä on 1 ml, kun taas oikeanpuoleisimman pipetin alin merkintä on 0,9 ml. Jotta keskimmäisellä pipetillä voidaan antaa 1,00 ml, neste on valutettava 0,00 ml:n merkistä 1,00 ml:n merkkiin, ja viimeinen senttimetri nestettä on säilytettävä. Jotta oikeanpuoleisimmalla pipetillä voidaan antaa 1,00 ml, neste on valutettava 0,00 ml:n merkistä kokonaan ulos kärjestä, ja tarkoituksena on antaa koko kapasiteetti.
:
a) pipettien alaosa, b) pipettien yläosa.Pipetit kalibroidaan "luovuttamaan" (TD) tai "säilyttämään" (TC) merkittyyn tilavuuteen. Pipetit merkitään merkinnällä T.C. tai T.D. näiden kahden lajin erottamiseksi toisistaan, ja to-deliver-pipetit merkitään myös kaksoisrenkaalla lähellä yläosaa (kuva 12 b). Kun "to-deliver"-pipetti on tyhjennetty, kärkeä on kosketettava pullon sivuun, jotta kaikki pinttyneet pisarat saadaan poistettua, ja kärkeen jää pieni määrä jäännösnestettä. Pipetti on kalibroitu siten, että se antaa vain sen nesteen, joka valuu vapaasti kärjestä. Kun "to-contain"-pipetti on tyhjennetty, kärkeen jäänyt neste on kuitenkin "puhallettava ulos" pipetin sipulilla. "To-contain"-pipetit voivat olla hyödyllisiä viskoosien nesteiden annostelussa, kun liuotinta voidaan käyttää koko sisällön huuhtelemiseen.
Tässä jaksossa kuvataan menetelmät kalibroidun lasipipetin käyttämiseksi. Nämä menetelmät on tarkoitettu käytettäväksi puhtaalla ja kuivalla pipetillä. Jos pipetin kärjessä on jäännösnestettä vedestä tai aiemmasta käytöstä vaihtoehtoisen liuoksen kanssa, on käytettävä uutta pipettiä. Vaihtoehtoisesti, jos reagenssi ei ole erityisen kallis tai reaktiivinen, pipetti voidaan "ehdollistaa" reagenssilla jäännösnesteen poistamiseksi. Kun pipetti halutaan kunnostaa, pipetti huuhdellaan kahdesti täydellä määrällä reagenssia ja kerätään huuhtelujäte jätesäiliöön. Kahden huuhtelun jälkeen reagenssi on korvannut pipetissä mahdollisesti jäljellä olevan nesteen. Kun reagenssi tämän jälkeen otetaan pipettiin, se ei ole laimennut tai muuttunut millään tavalla.
Kalibroidun lasipipetin käyttö.
Kalibroidun lasipipetin käyttö.
- Aseta pipetin kärki reagenssiin, purista polttimo ja liitä se pipetin yläosaan (kuva 12 a ja b).
- Vapauta osittain painetta polttimosta imun aikaansaamiseksi, mutta älä vapauta kättäsi kokonaan, sillä muuten saatat luoda liian suuren tyhjiön, jolloin neste vetäytyy väkivaltaisesti pipetin polttimoon. Imua on käytettävä, kunnes neste nousee juuri halutun merkin ohi (kuva 12 c).
- Riko tiiviste ja poista pipetin tulppa ja aseta sormi nopeasti pipetin päälle, jotta neste ei valuisi ulos (kuva 12 d).
- Päästetään pipetin yläosaan pieniä määriä ilmaa, jotta neste valuu hitaasti ja hallitusti, kunnes meniski on halutussa tilavuudessa (kuvassa 13 a on 0,00 ml).
- Pidä pipetin yläosaa tiukasti kiinni sormella, vie pipetti pulloon, johon neste on tarkoitus antaa, ja päästä jälleen pieniä määriä ilmaa pipetin yläosaan, jotta neste valuu hitaasti haluttuun merkkiin (kuvassa 13 b ja c näkyy, että annettu tilavuus on hieman alle 0,20 ml).
- Kosketa pipetin kärkeä astian sivuun, jotta mahdolliset roikkuvat pisarat irtoavat, ja poista pipetti.
- Jos nestettä valui pipetin pohjalle T.C.-pipetillä, puhalla pipettipullon paineella jäännöspisara pois. Älä puhalla jäännöspisaraa ulos, kun käytät T.D. pipettiä.
- Jos käytetään tilavuuspipettiä, neste on poistettava imulla lasipullon yläpuolella olevaan merkittyyn viivaan asti (merkitty kuvassa 13 d). Neste voidaan tyhjentää uuteen astiaan sormella, joka irrotetaan kokonaan yläreunasta. Kun neste lakkaa valumasta, kärkeä on kosketettava pullon sivuun, jotta mahdolliset kiinni olevat pisarat saadaan poistettua, mutta jäljelle jäävää pisaraa ei saa pakottaa ulos (kuten T.D.-pipetillä).
Erittäin haihtuvien nesteiden annostelu.
Kun yritetään annostella erittäin haihtuvia nesteitä (esim. dietyylieetteriä) pipetillä, on hyvin tavallista, että pipetistä tippuu nestettä ulos jopa ilman tippalampun painetta! Tämä tapahtuu, kun neste haihtuu pipetin otsatilaan, ja ylimääräinen höyry aiheuttaa sen, että otsatilan paine ylittää ilmakehän paineen. Jos haluat estää pipetin tippumisen, vedä neste takaisin ja työnnä se ulos pipettiin useita kertoja. Kun välitila on kyllästynyt liuotinhöyryillä, pipetti ei enää tipu.
Kuumien nesteiden kaataminen.
Kuumaa nestettä sisältävää astiaa voi olla vaikea käsitellä paljain käsin. Jos kuumaa nestettä kaadetaan dekantterilasista, voidaan käyttää silikonista kuumien käsien suojainta (kuva 14 a) tai dekantteripihtiä (kuvat 14 b ja c).
Kun kuumaa nestettä kaadetaan Erlenmeyer-pullosta, voidaan käyttää myös kuumakäsisuojia, mutta ne eivät pidä pullon hankalaa muotoa kovinkaan tukevasti. Kuumasta Erlenmeyer-pullosta kaataminen onnistuu käyttämällä tilapäistä "paperipyyhepidikettä". Pitkä paperipyyhkeen osa taitetaan useita kertoja yhteen suuntaan noin yhden tuuman paksuiseksi (ja kiinnitetään haluttaessa laboratorioteipillä, kuva 15 a). Tämä taitettu paperipyyhe voidaan kietoa dekantterilasin tai Erlenmeyer-pullon yläosan ympärille ja puristaa kiinni, jotta pullo pysyy paikallaan (kuva 14 d ja kuva 15 b).
Kun kuumaa nestettä kaadetaan Erlenmeyer-pullosta, paperipyyhkeen pidikkeen on oltava riittävän kapea, jotta pyyhe ei ulotu pullon yläreunaan asti. Jos näin tapahtuu, neste imeytyy paperia kohti kaadettaessa, mikä heikentää pidikettä ja poistaa mahdollisesti arvokasta liuosta (kuva 15 c). Kun paperipyyhe on jonkin matkan päässä kolvin yläreunasta, nestettä voidaan kaataa kolvista ilman, että se imee nestettä (kuva 15 d).
Kun kuumaa nestettä kaadetaan Erlenmeyer-pullosta, paperipyyhkeen pidikkeen on oltava riittävän kapea, jotta pyyhe ei ulotu pullon yläreunaan asti. Jos näin tapahtuu, neste imeytyy paperia kohti kaadettaessa, mikä heikentää pidikettä ja poistaa mahdollisesti arvokasta liuosta (kuva 15 c). Kun paperipyyhe on jonkin matkan päässä kolvin yläreunasta, nestettä voidaan kaataa kolvista ilman, että se imee nestettä (kuva 15 d).
Johtopäätökset.
Toivottavasti tämä opas antoi sinulle tarvittavat tiedot, joita olit etsinyt. Kuvasin kolme menetelmää niin hyvin kuin pystyn. Jos sinulla on vielä kysymyksiä, voit kysyä minulta täällä.
Last edited: