Az indol-3-laktát-pótlás hatása a szklerózis multiplex állatmodellekben
A semmiből indulok alapvető bokormechanikai ismeretekkel.
Nincs sok minden, amit nem tudnék elég idővel megtenni, de ez a degeneratív betegséggel kapcsolatos probléma.
Mint tudod, nehéz információt szerezni az orvosi szakmától vagy a vegyipari beszállítóktól.
Élni akarok.
Nem állítom, hogy ez értékes, de talán segíthetne többet megérteni.
A legjobb, amit eddig találtam, a vegyi anyagok beszállítóinak oldalain található adatok:
Hogyan készítsük el a törzsoldatot?
Kérjük, válasszon megfelelő oldószert a koncentrált törzsoldat elkészítéséhez a kísérlet követelményeinek megfelelően. Az oldhatósági információk a weboldalunk termékoldalán találhatók. In-vitro kísérletekhez gyakran DMSO-t használnak oldószerként.
A törzsoldatot ezután hígítják, hogy munkaoldatot készítsenek (pl. 1:1000-es hígítás sejttenyésztő közegben).
Íme néhány ajánlás a termék feloldásához:
(1) Számítsa újra a törzsoldat koncentrációját a következő képlet szerint: Tényleges koncentráció (mg/ml) = molekulatömeg (g/mol) x koncentráció (mM) x 10-3
(2) Ellenőrizze, hogy az oldószer nem szennyeződött-e,pl. a DMSO elnyeli a nedvességet.
(3) Egyes vegyületek szerkezetük és kémiai jellemzőik miatt nehezen oldódnak, és további keverést, például örvénylést vagy ultrahangos keverést igényelhetnek. Szükség esetén a vegyület melegítése is segítheti az oldódási folyamatot. Ne feledje azonban, hogy a vegyületet ne melegítse 45 ℃-nál magasabbra, hogy elkerülje a termék megváltoztatását.
Hogyan kell tárolni a terméket?
Tárolja -20 ℃ vagy -80 ℃ -on Aliquotálja a törzsoldatot a rutin felhasználási mennyiségekre, és tárolja -20 ℃ vagy -80 ℃ -on. Kerülje az ismételt fagyasztást és felolvasztást.
Hogyan kell elkészíteni a munkaoldatot?
(1) Számítsa ki a szükséges hígítást a hígítási kalkulátorunk segítségével.
(2) Adja lassan a törzsoldatot az oldószerhez, amíg el nem éri a kívánt koncentrációt.
Keverje össze vortexeléssel vagy ismételt pipettázással.
(3) Ha a munkaoldatban csapadék jelen van, hagyja a munkaoldatot 10 percig állni, keverje el vortexszel vagy pipettával, majd ellenőrizze újra.
(4) Vegyületeink többnyire zsírban oldódó vegyületek. Vizes oldószerekkel, például sejttenyésztő táptalajjal vagy PBS-szel történő hígításkor csapadék jelen lehet A teljes feloldás ultrahanggal érhető el.
Mire kell figyelni a sejtalapú vizsgálatoknál?
A legtöbb sejtalapú vizsgálatban DMSO-t használnak a törzsoldat elkészítéséhez. A törzsoldatot a tenyésztőközegben hígítják a munkaoldat elkészítéséhez. Ügyeljen arra, hogy a DMSO koncentrációja <=0,1% legyen, hogy elkerülje a sejtek mérgezését Általában a negatív kontroll a kísérletben az azonos koncentrációjú DMSO-t tartalmazó táptalaj.
Mire kell figyelni az állatkísérleteknél?
(1) A vegyületeink többnyire zsírban oldódó vegyületek. Ha DMSO-t használunk a törzsoldat elkészítéséhez, majd hígítjuk az állatkísérletekhez szükséges munkaoldat elkészítéséhez, előfordulhat, hogy nem tudjuk elérni a szükséges dózisokat. Ehelyett hidrotróp hatóanyagokra, például nátrium-karboximetil-cellulózra (CMC-Na), Tween 80-ra vagy glicerinre van szükség.
Például az egérnél használt dózis(20m/kg) átváltásához a 1,5 kg-os nyúlnál használt dózisra:
A csoportos állat: egér; B csoportos állat: Nyúl;
Átváltási együttható:
A nyúlnál alkalmazott dózis 1,5kg*(0,37*20mg/kg) =11,1mg lenne.
