Bevezetés.
Hogyan működik a vékonyréteg-kromatográfia?
Elkészítése.
A kromatogram előállítása.
Vegyünk egy műanyag vagy üvegedényt, öntsünk rá 10-15 ml vizet, 4-5 csepp jódos alkoholos oldatot. Keverjük 7-10 percig. Csöpögtesse le a vizet. A jód kicsapódik a vízben az üveg oldalán. Tegye ezt az üveget a tartályba.
Retenciós tényező
Az elválasztás befejezése után az egyes vegyületek függőlegesen elválasztott foltokként jelennek meg. Minden egyes foltnak van egy retenciós tényezője (Rf), amely megegyezik az oldószer által megtett teljes távolsághoz viszonyított migrált távolsággal. Az Rf képlet a következő: Rf= a minta által megtett távolság/az oldószer által megtett távolság.
Az Rf-érték az egyes vegyületek egyedisége miatt használható a vegyületek azonosítására. Ha két különböző vegyületet hasonlítunk össze azonos körülmények között, akkor a nagyobb Rf-értékkel rendelkező vegyület kevésbé poláris, mert nem tapad meg olyan sokáig az állófázison, mint a poláris vegyület, amelynek kisebb Rf-értéke lenne. Az Rf-értékeket és a reprodukálhatóságot számos különböző tényező befolyásolhatja, mint például a rétegvastagság, a TLC-lemezen lévő nedvesség, az edény telítettsége, a hőmérséklet, a mozgófázis mélysége, a TLC-lemez jellege, a minta mérete és az oldószer paraméterei. Ezek a hatások általában az Rf-értékek növekedését okozzák. Rétegvastagság esetén azonban az Rf-érték csökkenne, mivel a mobilfázis lassabban halad felfelé a lemezen.
Eredmények megvitatása
Metamfetamin - 0,55
Mefedron - 0,65
Következtetés.
A kromatográfiát anyagok keverékeinek alkotórészeire történő szétválasztására használják. A kromatográfia minden formája ugyanazon az elven működik. Ebben a cikkben ezt a módszert az amfetamin metamfetamin és a mefedron Rf meghatározásával fogom elmagyarázni.
A kromatográfiás lemezek egy állófázissal (szilárd anyag vagy szilárd anyagon hordozott folyadék) és egy mozgófázissal (folyadék vagy gáz) rendelkeznek. A mobil fázis átáramlik az állófázison, és magával viszi a keverék összetevőit. A különböző komponensek különböző sebességgel haladnak. Ennek okait az oldal további részében fogjuk megvizsgálni. A vékonyréteg-kromatográfiát pontosan úgy végzik, ahogy a neve is mondja - egy vékony, egyenletes szilikagél- vagy alumínium-dioxid-réteggel, amelyet egy üveg-, fém- vagy merev műanyagdarabra vontak fel. A szilikagél (vagy a timföld) az állófázis. A vékonyréteg-kromatográfia állófázisa gyakran tartalmaz olyan anyagot is, amely UV-fényben vagy jódkamrában fluoreszkál - a későbbiekben ismertetett okokból. A mozgófázis egy megfelelő folyékony oldószer vagy oldószerek keveréke.
A kromatográfiás lemezek egy állófázissal (szilárd anyag vagy szilárd anyagon hordozott folyadék) és egy mozgófázissal (folyadék vagy gáz) rendelkeznek. A mobil fázis átáramlik az állófázison, és magával viszi a keverék összetevőit. A különböző komponensek különböző sebességgel haladnak. Ennek okait az oldal további részében fogjuk megvizsgálni. A vékonyréteg-kromatográfiát pontosan úgy végzik, ahogy a neve is mondja - egy vékony, egyenletes szilikagél- vagy alumínium-dioxid-réteggel, amelyet egy üveg-, fém- vagy merev műanyagdarabra vontak fel. A szilikagél (vagy a timföld) az állófázis. A vékonyréteg-kromatográfia állófázisa gyakran tartalmaz olyan anyagot is, amely UV-fényben vagy jódkamrában fluoreszkál - a későbbiekben ismertetett okokból. A mozgófázis egy megfelelő folyékony oldószer vagy oldószerek keveréke.
A szilikagél a szilícium-dioxid (szilícium-dioxid) egy formája. A szilíciumatomok oxigénatomokon keresztül óriási kovalens szerkezetben kapcsolódnak egymáshoz. A szilikagél felületén azonban a szilíciumatomok -OH-csoportokhoz kapcsolódnak. Tehát a szilikagél felületén Si-O-Si kötések helyett Si-O-H kötések vannak. Az ábra a szilikagél felületének egy kis részét mutatja. A szilikagél felülete nagyon poláris, és a -OH csoportok miatt hidrogénkötéseket tud kialakítani a körülötte lévő megfelelő vegyületekkel, valamint Van-der-Waals diszperziós erőket és dipólus-dipólus vonzásokat.
Szükséged lesz rá:
1. Fecskendő 5 ml-hez х 4
2. Műanyag vizeletvizsgálati edény х 4
3. Nagy műanyag edények az ételekhez (vagy egy nagy főzőpohár és egy műanyag edény) х 2
4. TLC lemez szilikagél réteggel 5x10 cm (ollóval nagyot lehet vágni).
5. Oldószerek etil-acetát, metanol, hexán (helyettesíthető szén-tetrakloriddal), ammónia legalább 10%-os vizes oldata, jódos alkoholos oldat.
6. Puha ceruza, vonalzó és fogó
Ne feledkezzünk meg a kesztyűről és a légzőkészülékről, a kísérletet szellőztetett helyiségben végezzük.
1. Fecskendő 5 ml-hez х 4
2. Műanyag vizeletvizsgálati edény х 4
3. Nagy műanyag edények az ételekhez (vagy egy nagy főzőpohár és egy műanyag edény) х 2
4. TLC lemez szilikagél réteggel 5x10 cm (ollóval nagyot lehet vágni).
5. Oldószerek etil-acetát, metanol, hexán (helyettesíthető szén-tetrakloriddal), ammónia legalább 10%-os vizes oldata, jódos alkoholos oldat.
6. Puha ceruza, vonalzó és fogó
Ne feledkezzünk meg a kesztyűről és a légzőkészülékről, a kísérletet szellőztetett helyiségben végezzük.
A kromatogram előállítása.
1. El kell készítenie egy folyékony oldatot etil-acetát:metanol:ammónia 85:10:5 arányú oldatot. 10 ml-hez 8,5 ml etil-acetátot, 1 ml metanolt és 0,5 ml ammóniaoldatot kell venni és összekeverni.
2. Tisztítsa meg a lemezt szilikagéllel ezzel az oldattal. Tegyük a lemezt az oldatba, 3-4 mm mélyen legyen a nagy főzőpohárban (mint az 1. képen). A kényelmes manipulációhoz használhat csipeszt. Fontos: ne nedvesítsük meg a lemezt vízzel, mert akkor tönkremegy. A lemezt addig kell az oldatba tartani, amíg az oldószer eleje a lemez felső széléig ér.
3. Kezdjük egy egyszerű esettel. Négy anyag van: amfetamin(A), metamfetamin(L), koffein(K) és mefedron(M).
Ehhez a kísérlethez a drogok szabad bázisát kell beszerezni. Tegyél 10-15 mg mintát (néhány csomót) egy üveg (műanyag) edénybe, tiszta két csepp vizes ammóniaoldatot. Ezután öntsünk 3-4 csepp hexánt vagy széntetrakloridot, és rázzuk egy percig. A szerves rétegben felhígul a hatóanyag szabad bázisa.4. Most a korábban elkészített kromatográfiás lemezre kell helyezni. Vegyünk egy tűt egy fecskendőből, és vágjuk le fogóval, mint a példában. Lapos élre van szüksége.
Vegyünk egy tiszta és megszáradt lemezt, és húzzunk egy ceruzavonalat ~5-6 mm-re az alsó szélétől felfelé. A lemezen lévő, a csepp eredeti helyét mutató feliratokat szintén ceruzával kell feltüntetni. Ha mindez tintával történt, a tintából származó festékek is elmozdulnak a kromatogram kialakulásakor. Jelöljön ki négy pontot egyenlő távolságra egymástól. Merítse a lecsippentett tű végét az első narkotikus oldat szerves rétegébe. Érintse meg a tű hegyével a lemezt, és készítsen egy 3-4 mm átmérőjű kis foltot, várja meg, amíg megszárad, ismételje meg az eljárást 10-szer. Ismételje meg a 2., 3. lépést a többi anyag esetében.
Gyakori hiba: ne csináljon nagy zsíros foltot, mert az Ön anyaga a kísérlet során átfedhet egy másik anyagot.
5. Amikor a szabad bázisok foltjai megszáradtak, a lemezt egy lefedett főzőpohárban sekély oldószerrétegben állítsuk. Fontos, hogy az oldószer szintje a foltot tartalmazó vonal alatt legyen. Várjuk meg, amíg az oldószer frontvonala eléri a lemez felső széle előtt 4-5 mm-t, és húzzuk ki. Ezután rajzoljon egy ceruzavonalat az oldószer elülső vonalára. Szárítsa meg levegőn.
6. A kromatogramot egy zárt edénybe (pl. egy másik, óraüveggel lefedett főzőpohárba vagy nagy műanyag edénybe) helyezzük néhány jódkristállyal együtt. A tartályban lévő jódgőz reagál a kromatogramon lévő foltokkal. A téged érdeklő anyagok színes foltokként jelenhetnek meg. Rajzold le őket ceruzával, és rajzolj pontokat az egyes foltok közepére.
Használhatsz 254 és 365 nm-es hullámhosszú UV-lámpát is.
Hogyan készítsük elő a jódkamrát.Gyakori hiba: ne csináljon nagy zsíros foltot, mert az Ön anyaga a kísérlet során átfedhet egy másik anyagot.
5. Amikor a szabad bázisok foltjai megszáradtak, a lemezt egy lefedett főzőpohárban sekély oldószerrétegben állítsuk. Fontos, hogy az oldószer szintje a foltot tartalmazó vonal alatt legyen. Várjuk meg, amíg az oldószer frontvonala eléri a lemez felső széle előtt 4-5 mm-t, és húzzuk ki. Ezután rajzoljon egy ceruzavonalat az oldószer elülső vonalára. Szárítsa meg levegőn.
Vegyünk egy műanyag vagy üvegedényt, öntsünk rá 10-15 ml vizet, 4-5 csepp jódos alkoholos oldatot. Keverjük 7-10 percig. Csöpögtesse le a vizet. A jód kicsapódik a vízben az üveg oldalán. Tegye ezt az üveget a tartályba.
Retenciós tényező
Az elválasztás befejezése után az egyes vegyületek függőlegesen elválasztott foltokként jelennek meg. Minden egyes foltnak van egy retenciós tényezője (Rf), amely megegyezik az oldószer által megtett teljes távolsághoz viszonyított migrált távolsággal. Az Rf képlet a következő: Rf= a minta által megtett távolság/az oldószer által megtett távolság.
A kísérletben a várt négy helyett három foltot kaptam. A kísérlet megismétlése azt mutatja, hogy a koffein nem eluálódik a 85:10:5 etil-cetát:metanol:ammónia 85:10:5 arányú etil-cetát:metanol:ammónia oldattal. Kísérletileg igazoltam, hogy ez az oldat alkalmas olyan kábítószerek eluálására, mint az amfetamin, metamfetamin és mefedron.
A vizsgált kábítószerek Rf-értékei.
Amfetamin - 0,53Metamfetamin - 0,55
Mefedron - 0,65
Magyarázat.
Két táblám van az eredményekkel. Két mért távolság a kezdőpont és a bekerített pont közepe között. Az amfetamin folt az első lemezen 42 mm-re, a második lemezen 49 mm-re ment a startvonaltól, az oldószer első vonala 85, illetve 86 mm-re. Rf1=42/85=0.49, Rf2=49/86=0.52. Ezután kiszámítottam a számtani átlagot 0,53. Ugyanezeket a számításokat végeztem el a többi anyagra is.
Két táblám van az eredményekkel. Két mért távolság a kezdőpont és a bekerített pont közepe között. Az amfetamin folt az első lemezen 42 mm-re, a második lemezen 49 mm-re ment a startvonaltól, az oldószer első vonala 85, illetve 86 mm-re. Rf1=42/85=0.49, Rf2=49/86=0.52. Ezután kiszámítottam a számtani átlagot 0,53. Ugyanezeket a számításokat végeztem el a többi anyagra is.
Következtetés.
A kísérlet azt mutatja, hogy meg lehet mérni a gyógyszer Rf értékét, és össze lehet hasonlítani az ismert anyaggal ugyanabban a lemezben. Készítsünk egy foltot a hatóanyagmentes bázisból és 1-4 foltot más hatóanyagból az Rf ellenőrzéséhez. Ha a foltok azonos távolságra vannak a kiindulási vonaltól, akkor valószínűleg ugyanarról az anyagról van szó. Továbbá, ha több foltot kap a drogból, akkor valószínűleg anyagkeverékről van szó. Egyes gyógyszerek több foltot mutatnak, mert a gyógyszer és a szintézis melléktermékeinek keveréke. Vékonyréteg-kromatográfiával azonban össze tudja hasonlítani őket más drogokkal.
Attachments
Last edited by a moderator:
