Impatto della supplementazione di indolo 3 lattato nei modelli animali di sclerosi multipla
Parto da zero con competenze meccaniche di base.
Non c'è molto che non possa fare con abbastanza tempo a disposizione, ma questo è il problema delle malattie degenerative.
Come saprete, è difficile ottenere informazioni dai medici o dai fornitori di prodotti chimici.
Voglio vivere.
Non pretendo che questo sia utile, ma forse lei può aiutarmi a capire meglio.
Il meglio che ho trovato finora è nei dati dei siti dei fornitori di prodotti chimici:
Come preparare la soluzione madre?
Selezionare un solvente adatto per preparare la soluzione madre concentrata in base ai requisiti dell'esperimento. Le informazioni sulla solubilità sono disponibili sulla pagina del prodotto del nostro sito web. Per gli esperimenti in vitro, spesso si usa il DMSO come solvente.
La soluzione madre viene poi diluita per ottenere una soluzione di lavoro (ad esempio, diluizione 1:1000 nel terreno di coltura cellulare).
Ecco alcune raccomandazioni per la dissoluzione del prodotto:
(1) Ricalcolare la concentrazione della soluzione madre secondo la seguente formula: Concentrazione effettiva (mg/mL) = Peso molecolare (g/mol) x Concentrazione (mM) x 10-3
(2) Verificare se il solvente è stato contaminato, ad esempio il DMSO assorbe l'umidità.
(3) Alcuni composti sono difficili da sciogliere a causa della loro struttura e delle loro caratteristiche chimiche e possono richiedere una miscelazione aggiuntiva, come il vortex o gli ultrasuoni. Se necessario, anche il riscaldamento del composto può aiutare il processo di dissoluzione. Ricordarsi però di non riscaldare il composto oltre i 45℃ per evitare di alterare il prodotto.
Come conservare il prodotto?
Conservare a -20℃ o a -80℃ Aliquotate la soluzione madre in volumi di uso corrente e conservatela a -20℃ o a -80℃. Evitare di congelare e scongelare ripetutamente.
Come preparare la soluzione di lavoro?
(1) Calcolare la diluizione necessaria utilizzando il nostro calcolatore di diluizione.
(2) Aggiungere lentamente la soluzione madre al solvente fino a ottenere la concentrazione desiderata.
Miscelare con il vortex o con ripetute pipettate.
(3) Se nella soluzione di lavoro è presente una precipitazione, lasciare riposare la soluzione di lavoro per 10 minuti, agitare con vortex o pipettare e ricontrollare.
(4) I nostri composti sono per lo più liposolubili. La precipitazione può essere presente quando si diluisce con solventi acquosi come il terreno di coltura cellulare o il PBS Una dissoluzione completa può essere ottenuta mediante ultrasuoni.
A cosa devo prestare attenzione per i saggi basati sulle cellule?
Nella maggior parte dei saggi cellulari si usa il DMSO per preparare la soluzione madre. La soluzione madre viene diluita nel terreno di coltura per preparare una soluzione di lavoro. Assicurarsi che la concentrazione di DMSO sia <=0,1% per evitare di avvelenare le cellule Di solito, il controllo negativo nell'esperimento è il terreno di coltura con DMSO alla stessa concentrazione.
A cosa devo prestare attenzione per gli esperimenti sugli animali?
(1) I nostri composti sono per lo più liposolubili. Se si usa il DMSO per preparare la soluzione madre e poi si diluisce per preparare la soluzione di lavoro per gli esperimenti sugli animali, potrebbe non essere possibile ottenere le dosi richieste. Sono invece necessari agenti idrotropici, come la carbossimetilcellulosa di sodio (CMC-Na), il Tween 80 o il glicerolo.
Ad esempio, per convertire la dose utilizzata per un topo (20m/kg) nella dose utilizzata per un coniglio di 1,5 kg:
Gruppo A Animale: topo; Gruppo B Animale: Coniglio;
Coefficiente di conversione:
0,37 La dose utilizzata nel coniglio sarebbe 1,5 kg*(0,37*20 mg/kg) =11,1 mg.
