Įvadas: Įvadas.
Kaip veikia plonasluoksnė chromatografija?
Paruošimas.
Chromatogramos sudarymas.
Paimkite vieną plastikinį arba stiklinį indelį, įpilkite 10-15 ml vandens, 4-5 lašus jodo spiritinio tirpalo. Maišykite 7-10 minučių. Išpilkite vandenį. Jodas nusėda vandenyje ant stiklainio šonų. Šį stiklainį įdėkite į indą.
Sulaikymo koeficientas
Atlikus atskyrimą, atskiri junginiai atrodo kaip vertikaliai atskirtos dėmės. Kiekviena dėmė turi sulaikymo koeficientą (Rf), kuris yra lygus migravusiam atstumui, palyginti su visu tirpiklio nueitu atstumu. Rf formulė yra tokia: Rf = atstumas, kurį nuėjo mėginys, ir atstumas, kurį nuėjo tirpiklis.
Rf vertė gali būti naudojama junginiams identifikuoti dėl jų unikalumo kiekvienam junginiui. Lyginant du skirtingus junginius tomis pačiomis sąlygomis, junginys, kurio Rf vertė didesnė, yra mažiau polinis, nes jis ne taip ilgai laikosi ant stacionariosios fazės kaip polinis junginys, kurio Rf vertė būtų mažesnė. Rf vertėms ir atkuriamumui įtakos gali turėti daug įvairių veiksnių, pavyzdžiui, sluoksnio storis, drėgmė ant TLC plokštelės, indo prisotinimas, temperatūra, judriosios fazės gylis, TLC plokštelės pobūdis, mėginio dydis ir tirpiklio parametrai. Dėl šio poveikio paprastai padidėja Rf vertės. Tačiau sluoksnio storio atveju Rf vertė sumažėtų, nes judrioji fazė lėčiau juda plokštelės viršumi.
Rezultatų aptarimas
metamfetaminas - 0,55
Mefedronas - 0,65
Išvada.
Chromatografija naudojama medžiagų mišiniams atskirti į sudedamąsias dalis. Visos chromatografijos formos veikia tuo pačiu principu. Šiame straipsnyje paaiškinsiu šį metodą apibrėždamas amfetamino metamfetamino ir mefedrono Rf.
Chromatografinės plokštelės turi stacionariąją fazę (kietąjį kūną arba ant kietojo kūno esantį skystį) ir judriąją fazę (skystį arba dujas). Judrioji fazė teka per stacionariąją fazę ir su savimi perneša mišinio komponentus. Skirtingi komponentai juda skirtingu greičiu. Toliau šiame puslapyje aptarsime to priežastis. Plonasluoksnė chromatografija atliekama būtent taip, kaip parašyta - naudojant ploną, vienodą silikagelio arba aliuminio oksido sluoksnį, padengtą ant stiklo, metalo arba standaus plastiko gabalėlio. Silikagelis (arba aliuminio oksidas) yra stacionarioji fazė. Plonasluoksnės chromatografijos stacionarioji fazė taip pat dažnai turi medžiagos, kuri fluorescuoja UV šviesoje arba jodo kameroje - dėl priežasčių, kurias pamatysite vėliau. Judrioji fazė yra tinkamas skystas tirpiklis arba tirpiklių mišinys.
Chromatografinės plokštelės turi stacionariąją fazę (kietąjį kūną arba ant kietojo kūno esantį skystį) ir judriąją fazę (skystį arba dujas). Judrioji fazė teka per stacionariąją fazę ir su savimi perneša mišinio komponentus. Skirtingi komponentai juda skirtingu greičiu. Toliau šiame puslapyje aptarsime to priežastis. Plonasluoksnė chromatografija atliekama būtent taip, kaip parašyta - naudojant ploną, vienodą silikagelio arba aliuminio oksido sluoksnį, padengtą ant stiklo, metalo arba standaus plastiko gabalėlio. Silikagelis (arba aliuminio oksidas) yra stacionarioji fazė. Plonasluoksnės chromatografijos stacionarioji fazė taip pat dažnai turi medžiagos, kuri fluorescuoja UV šviesoje arba jodo kameroje - dėl priežasčių, kurias pamatysite vėliau. Judrioji fazė yra tinkamas skystas tirpiklis arba tirpiklių mišinys.
Silikagelis yra silicio dioksido (silicio dioksido) forma. Silicio atomai sujungti per deguonies atomus į milžinišką kovalentinę struktūrą. Tačiau silicio gelio paviršiuje silicio atomai yra prijungti prie -OH grupių. Taigi silicio gelio paviršiuje yra Si-O-H jungtys, o ne Si-O-Si jungtys. Schemoje parodyta nedidelė silicio dioksido paviršiaus dalis. Silicio gelio paviršius yra labai poliarinis ir dėl -OH grupių gali sudaryti vandenilinius ryšius su aplink jį esančiais tinkamais junginiais, taip pat Van-der-Waals dispersines jėgas ir dipolinę-dipolinę trauką.
Jums reikia:
1. 5 ml švirkšto x 4
2. Plastikinio stiklainio šlapimui tirti х 4
3. Dideli plastikiniai indai maistui (arba viena didelė stiklinė ir plastikinis indas) х 2
4. TLC plokštelė su silikagelio sluoksniu 5x10 cm (didelę plokštelę galite iškirpti žirklėmis)
5. Tirpikliai etilacetatas, metanolis, heksanas (galima pakeisti anglies tetrachloridu), 10 % ar didesnis amoniako vandeninis tirpalas, jodo spiritinis tirpalas
6. Minkštas pieštukas, liniuotė ir replės
Nepamirškite pirštinių ir respiratoriaus, eksperimentą atlikite vėdinamoje patalpoje.
1. 5 ml švirkšto x 4
2. Plastikinio stiklainio šlapimui tirti х 4
3. Dideli plastikiniai indai maistui (arba viena didelė stiklinė ir plastikinis indas) х 2
4. TLC plokštelė su silikagelio sluoksniu 5x10 cm (didelę plokštelę galite iškirpti žirklėmis)
5. Tirpikliai etilacetatas, metanolis, heksanas (galima pakeisti anglies tetrachloridu), 10 % ar didesnis amoniako vandeninis tirpalas, jodo spiritinis tirpalas
6. Minkštas pieštukas, liniuotė ir replės
Nepamirškite pirštinių ir respiratoriaus, eksperimentą atlikite vėdinamoje patalpoje.
Chromatogramos sudarymas.
1. Turite paruošti sklandų etilacetato: metanolio: amoniako 85:10:5 tirpalą. 10 ml reikia paimti 8,5 ml etilacetato, 1 ml metanolio ir 0,5 ml amoniako tirpalo ir sumaišyti.
2. Šiuo tirpalu išvalykite plokštelę su silikageliu. Įdėkite plokštelę į tirpalą, ji turi būti 3-4 mm gylyje didelėje stiklinėje (kaip 1 pav.). Patogiai manipuliacijai galite naudoti pincetą. Svarbu: nesušlapinkite plokštelės vandeniu, nes ji bus sugadinta. Plokštelę reikia laikyti tirpale tol, kol tirpiklio priekis pasieks viršutinį plokštelės kraštą.
3. Pradėsime nuo paprasto atvejo. Yra keturios medžiagos: amfetaminas(A), metamfetaminas(L), kofeinas(K) ir mefedronas(M).
Šiam eksperimentui reikia gauti laisvą narkotikų bazę. Į stiklinį (plastikinį) indelį įdėkite 10-15 mg mėginio (kelis gabalėlius), gryno du lašus vandeninio amoniako tirpalo. Tada įpilkite 3-4 lašus heksano arba tetrachlormetano ir vieną minutę pakratykite. Laisvoji jūsų vaisto bazė praskiedžiama organiniame sluoksnyje.4. Dabar jį reikia uždėti ant anksčiau paruoštos chromatografinės plokštelės. Paimkite adatą iš švirkšto ir ją nukirpkite replėmis, kaip parodyta pavyzdyje. Turite gauti plokščią kraštą.
Paimkite švarią ir išdžiovintą plokštelę ir pieštuku nubrėžkite liniją ~5-6 mm aukštyn nuo apatinio krašto. Bet koks žymėjimas ant plokštelės, rodantis pradinę lašo padėtį, taip pat turi būti pieštuku. Jei visa tai buvo atlikta rašalu, chromatogramai vystantis, rašalo dažai taip pat judės. Pažymėkite keturis taškus vienodu atstumu tarp jų. Nukirptos adatos galą panardinkite į organinį pirmojo narkotinio tirpalo sluoksnį. Adatos galu palieskite plokštelę ir padarykite nedidelį 3-4 mm skersmens taškelį, palaukite, kol jis išdžius, procedūrą pakartokite 10 kartų. Pakartokite 2, 3 etapus kitoms medžiagoms.
Dažniausiai pasitaikanti klaida: nedarykite didelės riebalinės dėmės, nes jūsų medžiaga eksperimento metu gali uždengti kitas medžiagas.
5. Kai laisvųjų bazių dėmės išdžiūsta, plokštelė statoma į negilų tirpiklio sluoksnį uždengtoje stiklinėje. Svarbu, kad tirpiklio lygis būtų žemiau linijos, ant kurios yra dėmė. Palaukiama, kol tirpiklio fronto linija pasieks 4-5 mm iki viršutinio plokštelės krašto, ir ji ištraukiama. Po to ant tirpiklio priekinės linijos pieštuku nubrėžkite liniją. Išdžiovinkite ją ore.
6. Chromatograma įdedama į uždarą indą (pvz., kitą stiklinę, uždengtą laikrodžio stiklu, arba į didelius plastikinius indus) kartu su keliais jodo kristalais. Konteineryje esantys jodo garai reaguoja su chromatogramos dėmėmis. Jus dominančios medžiagos gali pasirodyti kaip spalvotos dėmės. Atsekite jas pieštuku ir kiekvienos dėmės centre nubrėžkite taškus.
Taip pat galite naudoti ultravioletinių spindulių lempą, kurios bangos ilgis 254 ir 365 nm.
Kaip iš anksto paruošti jodo kamerą.Dažniausiai pasitaikanti klaida: nedarykite didelės riebalinės dėmės, nes jūsų medžiaga eksperimento metu gali uždengti kitas medžiagas.
5. Kai laisvųjų bazių dėmės išdžiūsta, plokštelė statoma į negilų tirpiklio sluoksnį uždengtoje stiklinėje. Svarbu, kad tirpiklio lygis būtų žemiau linijos, ant kurios yra dėmė. Palaukiama, kol tirpiklio fronto linija pasieks 4-5 mm iki viršutinio plokštelės krašto, ir ji ištraukiama. Po to ant tirpiklio priekinės linijos pieštuku nubrėžkite liniją. Išdžiovinkite ją ore.
Paimkite vieną plastikinį arba stiklinį indelį, įpilkite 10-15 ml vandens, 4-5 lašus jodo spiritinio tirpalo. Maišykite 7-10 minučių. Išpilkite vandenį. Jodas nusėda vandenyje ant stiklainio šonų. Šį stiklainį įdėkite į indą.
Sulaikymo koeficientas
Atlikus atskyrimą, atskiri junginiai atrodo kaip vertikaliai atskirtos dėmės. Kiekviena dėmė turi sulaikymo koeficientą (Rf), kuris yra lygus migravusiam atstumui, palyginti su visu tirpiklio nueitu atstumu. Rf formulė yra tokia: Rf = atstumas, kurį nuėjo mėginys, ir atstumas, kurį nuėjo tirpiklis.
Eksperimento metu vietoj numatytų keturių dėmių gavau tris. Pakartojus eksperimentą paaiškėjo, kad kofeino neeliminuoja etilo cetato, metanolio ir amoniako 85:10:5 tirpalas. Eksperimentiškai patvirtinta, kad šis tirpalas tinka tokiems narkotikams, kaip amfetaminas, metamfetaminas ir mefedronas, išskirti.
Tirtų narkotikų Rf.
Amfetaminas - 0,53metamfetaminas - 0,55
Mefedronas - 0,65
Paaiškinimas.
Turiu dvi plokšteles su rezultatais. Du išmatuoti atstumai tarp pradinio taško ir apsuptos dėmės vidurio. Amfetamino dėmė pirmoje plokštelėje buvo 42, o antroje - 49 mm nuo pradžios linijos, tirpiklio priekinė linija buvo atitinkamai 85 ir 86 mm. Rf1=42/85=0.49, Rf2=49/86=0.52. Tada apskaičiavau aritmetinį vidurkį 0,53. Tokie pat skaičiavimai buvo atlikti ir kitoms medžiagoms.
Turiu dvi plokšteles su rezultatais. Du išmatuoti atstumai tarp pradinio taško ir apsuptos dėmės vidurio. Amfetamino dėmė pirmoje plokštelėje buvo 42, o antroje - 49 mm nuo pradžios linijos, tirpiklio priekinė linija buvo atitinkamai 85 ir 86 mm. Rf1=42/85=0.49, Rf2=49/86=0.52. Tada apskaičiavau aritmetinį vidurkį 0,53. Tokie pat skaičiavimai buvo atlikti ir kitoms medžiagoms.
Išvada.
Kaip rodo eksperimentas, galite išmatuoti savo vaisto Rf ir palyginti su žinomos medžiagos Rf toje pačioje plokštelėje. Padarykite savo vaisto be pagrindo dėmę ir 1-4 kitų vaistų dėmes, kad patikrintumėte Rf. Jei dėmės yra tuo pačiu atstumu nuo pradinės linijos, tai tikriausiai yra ta pati medžiaga. Be to, jei iš jūsų vaisto gaunamos kelios dėmės, tikriausiai turite medžiagų mišinį. Kai kurie vaistai turi kelias dėmes, nes jie yra vaisto ir šalutinių sintezės produktų mišinys. Tačiau juos galite palyginti su kitais narkotikais naudodami plonasluoksnę chromatografiją.
Attachments
Last edited by a moderator:
