Introdução.
O principal objetivo desta pesquisa é avaliar a possibilidade de determinação dos principais medicamentos em fluidos biológicos por métodos expressos disponíveis publicamente em casa. Este artigo responde às seguintes perguntas.
- O teste de farmácia para $3-20 realmente revela o fato de usar as substâncias declaradas? (As tiras de teste combinadas clássicas contêm escalas para a determinação de anfetamina, metanfetamina, cocaína, maconha e opiáceos).
- Essas tiras de teste podem ser úteis para Alfa-PVP e Mefedrona? (Não há testes especializados em farmácias)
O motivo de usar o teste de farmácia mais comum, que é fácil de comprar, é que a pesquisa deve ser útil e ter aplicação prática.
Importante: outros kits de testes de fluxo lateral (LFTs) com rótulos diferentes podem ser usados; a empresa fabricante não importa, pois qualquer kit de teste tem o mesmo mecanismo de funcionamento e tem eficácia comparável.
Sobre o LFT.
Os testes de fluxo lateral (LFTs), também conhecidos como ensaios imunocromatográficos de fluxo lateral ou testes rápidos, são dispositivos simples destinados a detectar a presença de uma substância-alvo em uma amostra líquida sem a necessidade de equipamentos especializados e caros. Esses testes são amplamente utilizados em diagnósticos médicos para testes domiciliares, testes em pontos de atendimento ou uso em laboratório. Por exemplo, o teste de gravidez caseiro é um LFT que detecta um hormônio específico. Esses testes são simples, econômicos e geralmente apresentam resultados em cerca de cinco a 30 minutos. Muitos aplicativos laboratoriais aumentam a sensibilidade dos LFTs simples empregando equipamentos adicionais dedicados.
Os LFTs operam com os mesmos princípios dos ensaios de imunoabsorção enzimática (ELISA). Essencialmente, esses testes fazem a amostra líquida passar pela superfície de um bloco com moléculas reativas que mostram um resultado visual positivo ou negativo. As almofadas são baseadas em uma série de leitos capilares, como pedaços de papel poroso, polímero microestruturado ou polímero sinterizado. Cada uma dessas almofadas tem a capacidade de transportar fluido (por exemplo, urina, sangue, saliva) espontaneamente.
A almofada de amostra atua como uma esponja e retém um excesso de fluido de amostra. Depois de encharcado, o fluido flui para a segunda almofada de conjugado, na qual o fabricante armazenou partículas bioativas liofilizadas chamadas conjugados (veja abaixo) em uma matriz de sal e açúcar. A almofada de conjugado contém todos os reagentes necessários para uma reação química otimizada entre a molécula alvo (por exemplo, um antígeno) e seu parceiro químico (por exemplo, anticorpo) que foi imobilizado na superfície da partícula. Essas marcas marcam as partículas-alvo à medida que elas passam pela almofada e continuam até as linhas de teste e controle. A linha de teste mostra um sinal, geralmente uma cor, como nos testes de gravidez. A linha de controle contém ligantes de afinidade que mostram se a amostra passou e se as biomoléculas na almofada conjugada estão ativas. Depois de passar por essas zonas de reação, o fluido entra no material poroso final, o pavio, que atua simplesmente como um recipiente de resíduos.
Os LFTs operam com os mesmos princípios dos ensaios de imunoabsorção enzimática (ELISA). Essencialmente, esses testes fazem a amostra líquida passar pela superfície de um bloco com moléculas reativas que mostram um resultado visual positivo ou negativo. As almofadas são baseadas em uma série de leitos capilares, como pedaços de papel poroso, polímero microestruturado ou polímero sinterizado. Cada uma dessas almofadas tem a capacidade de transportar fluido (por exemplo, urina, sangue, saliva) espontaneamente.
A almofada de amostra atua como uma esponja e retém um excesso de fluido de amostra. Depois de encharcado, o fluido flui para a segunda almofada de conjugado, na qual o fabricante armazenou partículas bioativas liofilizadas chamadas conjugados (veja abaixo) em uma matriz de sal e açúcar. A almofada de conjugado contém todos os reagentes necessários para uma reação química otimizada entre a molécula alvo (por exemplo, um antígeno) e seu parceiro químico (por exemplo, anticorpo) que foi imobilizado na superfície da partícula. Essas marcas marcam as partículas-alvo à medida que elas passam pela almofada e continuam até as linhas de teste e controle. A linha de teste mostra um sinal, geralmente uma cor, como nos testes de gravidez. A linha de controle contém ligantes de afinidade que mostram se a amostra passou e se as biomoléculas na almofada conjugada estão ativas. Depois de passar por essas zonas de reação, o fluido entra no material poroso final, o pavio, que atua simplesmente como um recipiente de resíduos.
Há dois tipos de LFT: método direto e competitivo.
O LFT direto (sanduíche) usa um conjugado anticorpo-tag infligido em uma membrana conjugada. Específicos para esse analito, os anticorpos são imobilizados na linha de teste, e os anticorpos anti-espécie específicos para anticorpos primários são imobilizados na linha de controle. Quando a amostra, que contém uma substância analisada, é aplicada à faixa de teste e essa amostra atinge a membrana com o conjugado, o analito se liga ao conjugado AT-tag. Em seguida, o complexo imune entra na zona de teste, onde se liga a anticorpos específicos, formando um "sanduíche" de Ab-Ag-Ab-tag. O excesso de conjugado não ligado se liga a anticorpos anti-espécie na linha de controle. Portanto, 2 linhas na tira de teste representam um resultado positivo. Se não houvernenhuma substância analisada na amostra, o conjugado se liga aos anticorpos anti-espécie somente na linha de controle, formando uma linha na tira de teste. O método LFT direto é usado para detectar compostos de alto peso molecular - vírus, incluindo o HIV; vários hormônios (por exemplo, em testes de gravidez), patógenos de doenças infecciosas.
O métodoLFT competitivo usado para a determinação de compostos de baixo peso molecular baseia-se na competição entre o analito e o conjugado analito imobilizado:proteína transportadora por um número limitado de locais de ligação para anticorpos específicos contidos no conjugado Ab-tag. Quando uma amostra contendo o analito é aplicada, ela se liga ao conjugado AT-tag na membrana do conjugado. Em seguida, o complexo imune passa pela zona de teste, onde o conjugado analito:proteína transportadora é imobilizado. O imunocomplexo não pode se ligar a esse conjugado devido a obstáculos estéricos: os compostos de baixo peso molecular geralmente têm um determinante antigênico e, portanto, os anticorpos têm um local de ligação ao antígeno, que já está ocupado pelo analito. Em seguida, o complexo imune é ligado por anticorpos anti-espécie na linha de controle. Como resultado, a ausência de uma faixa colorida na zona de teste e a presença de uma cor na zona de controle indicam que a concentração do analito na amostra de teste excede o valor limite para esse teste.
Se não houver análise na amostra, o conjugado Ab-tag se liga ao conjugado Ag:proteína transportadora imobilizado na zona da linha de teste. O conjugado Ab-tag não ligado entra na zona da linha de controle e se liga a ela com anticorpos anti-espécie. Assim, a presença de duas linhas coloridas (teste e controle) é um resultado negativo da análise.
O formato competitivo de LFT é usado para detectar compostos de baixo peso molecular, inclusive metabólitos de compostos narcóticos na urina, no fluido oral e em extratos de tecidos.
O métodoLFT competitivo usado para a determinação de compostos de baixo peso molecular baseia-se na competição entre o analito e o conjugado analito imobilizado:proteína transportadora por um número limitado de locais de ligação para anticorpos específicos contidos no conjugado Ab-tag. Quando uma amostra contendo o analito é aplicada, ela se liga ao conjugado AT-tag na membrana do conjugado. Em seguida, o complexo imune passa pela zona de teste, onde o conjugado analito:proteína transportadora é imobilizado. O imunocomplexo não pode se ligar a esse conjugado devido a obstáculos estéricos: os compostos de baixo peso molecular geralmente têm um determinante antigênico e, portanto, os anticorpos têm um local de ligação ao antígeno, que já está ocupado pelo analito. Em seguida, o complexo imune é ligado por anticorpos anti-espécie na linha de controle. Como resultado, a ausência de uma faixa colorida na zona de teste e a presença de uma cor na zona de controle indicam que a concentração do analito na amostra de teste excede o valor limite para esse teste.
Se não houver análise na amostra, o conjugado Ab-tag se liga ao conjugado Ag:proteína transportadora imobilizado na zona da linha de teste. O conjugado Ab-tag não ligado entra na zona da linha de controle e se liga a ela com anticorpos anti-espécie. Assim, a presença de duas linhas coloridas (teste e controle) é um resultado negativo da análise.
O formato competitivo de LFT é usado para detectar compostos de baixo peso molecular, inclusive metabólitos de compostos narcóticos na urina, no fluido oral e em extratos de tecidos.
Explicação mais simples.
Se você não entendeu, eu explicaria de uma forma mais simples. Há anticorpos marcados no início de cada tira de teste. Devido à estrutura da tira de teste, a urina se espalha ao longo dela, levando os complexos resultantes para a área de teste, onde os ligamentos droga-proteína são fixados. Como o anticorpo do complexo imune que chegou já foi absorvido pela droga da urina, ele não consegue se fixar na zona de teste e segue para a zona de controle, onde se liga ao anticorpo anti-espécie, colorindo uma tira na escala (resultado positivo).
Se não houver droga na amostra biológica, os anticorpos se movem na urina ao longo da tira de teste, permanecendo livres. Quando o complexo anticorpo-proteína se encontra na área de teste, alguns anticorpos marcados se ligam a ele (aparece a primeira tira), o restante se move com o fluxo de urina na área de controle, onde também se liga ao anticorpo anti-espécie, destacando a segunda tira (2 tiras - resultado negativo). Se a linha aparecer na zona de teste, mas não aparecer na zona de controle (deve sempre aparecer), o teste está com defeito.
Se não houver droga na amostra biológica, os anticorpos se movem na urina ao longo da tira de teste, permanecendo livres. Quando o complexo anticorpo-proteína se encontra na área de teste, alguns anticorpos marcados se ligam a ele (aparece a primeira tira), o restante se move com o fluxo de urina na área de controle, onde também se liga ao anticorpo anti-espécie, destacando a segunda tira (2 tiras - resultado negativo). Se a linha aparecer na zona de teste, mas não aparecer na zona de controle (deve sempre aparecer), o teste está com defeito.
As substâncias foram usadas por voluntários que não tomaram nada psicoativo por um período de tempo suficiente e a urina foi coletada para análise. Aqui estão os resultados do experimento.
Experimentos.
AMPHETAMINAPrincipais metabólitos: anfetamina, 4-hidroxianfetamina, 4-hidroxinorefedrina, 4-hidroxifenilacetona, ácido benzoico, ácido hipúrico, norefedrina, fenilacetona.
COCAÍNA.
Metabólitos principais: benzoilecgonina, éster metílico de ecgonina, ecgonina, norcocaína, p-hidroxicaína, m-hidroxicaína, p-hidroxibenzolecgonina, m-hidroxibenzolecgonina.
Se você observar o teste à direita, poderá ver por que as tiras de teste devem ser manuseadas com um ponto de vista crítico. A pessoa testada não fez uso recente de nenhuma PAS, exceto cocaína.
HEROÍNA.
Principais metabólitos: morfina, normorfina, hidromorfona.
MDMA / ECSTASY.
Principais metabólitos: 3,4-metilenodioximetanfetamina (MDMA), 3,4-metilenodioxianfetamina (MDA), 4-hidroxi-3-metoximetanfetamina (HMMA), 4-hidroxi-3-metoxianfetamina (HMA).
Há tiras de teste de MDMA/Ecstasy disponíveis, mas são mais difíceis de encontrar. A anfetamina e a metanfetamina foram encontradas na urina. Isso é explicado pelo fato de pertencerem à mesma classe e, consequentemente, pela semelhança estrutural das substâncias e de seus metabólitos. As escalas de THC (canabinoides) e OPI (opiáceos) no segundo teste não participam do experimento (não são ativadas). De acordo com a foto à esquerda, essas substâncias não são detectadas em conexão com o uso de MDMA.
MEFEDRONA.
Metabólitos principais: mefedrona, nor-mefedrona, 4'-carboxi-mefedrona, 1'-di-hidro-mefedrona, N-succinil-nor-mefedrona.
Um comentário interessante dos editores do site https://www.zoomtesting.co.uk,"Alguns fornecedores apontam que um teste de metanfetamina pode ser usado para detectar a mefedrona. Entretanto, isso é incorreto. A estrutura química da metanfetamina e da mefedrona é diferente, portanto o teste de metanfetamina não é válido para a mefedrona". Bem, vamos dar uma olhada nisso.
Além das substâncias padrão, outra tira de teste foi usada para testar barbitúricos. Há claramente algo errado com essa tira de teste. O teste foi repetido por outro voluntário que nunca havia usado barbitúricos ou preparações que os contivessem, com um resultado semelhante.
ALFA-PVP (alfa-pirrolidinovalerofenona).
A segunda linha na janela do PCP está quase totalmente ausente.
MARIJUANA.
Principais metabólitos: tetrahidrocanabinol (THC), 11-hidroxi-THC, 11-nor-9-carboxi-THC. Cannabis bem determinada e sempre apenas em sua janela "THC" (tetrahidrocanabinol), é suficiente para demonstrar no teste mais simples.
Conclusão.
Os testes detectam drogas em fluidos corporais há muito mais tempo do que seu efeito psicoativo é sentido. Eles são bastante baratos, têm boa sensibilidade e são apenas marginalmente inferiores aos métodos usados em laboratório. Lembre-se de sua segurança - se houver necessidade de verificar sua "limpeza" por conta própria, os testes expressos serão indispensáveis.
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