Metode GC-MS pentru medicamente

[G.Patton]

Introducere:

Am o vastă experiență în determinarea calității medicamentelor prin cromatografie-spectrometrie de masă. Am decis să scriu această instrucțiune pentru chimiști, care doresc să înceapă testarea medicamentelor prin echipamente GC-MS.
În ciuda gamei largi de oportunități ale cromato-spectrometriei de masă, există limitări ale posibilităților. Detectorul de masă în tandem cu cromatograful nu poate determina substanțe anorganice, substanțe organice cu greutate moleculară mai mare de 450 Da sau substanțe organice cu temperatură ridicată de fierbere (>350 ◦C).

Caracteristicile echipamentului:

În primul rând, trebuie să vă definiți posibilitatea de a furniza analize utilizând cromatograful de gaze. Cele mai populare sisteme GC-MS adecvate, cum ar fi cromatograful de gaze Agilent 7890, cuplat la un detector de masă cvadripolar Agilent 5975C sau Thermo Scientific ISQ 7000 Single Quadrupole GC-MS ar putea fi utilizate pentru aceste obiective. Caracteristica principală, pe care trebuie să o cunoașteți - este polaritatea unei coloane capilare. Pentru majoritatea medicamentelor, aveți nevoie de coloană capilară nepolară sau slab polară. De exemplu, HP-1/DB-1 sau HP-5/DB-5 sunt cea mai bună alegere pentru o gamă largă de aplicații. De asemenea, trebuie să cunoașteți intervalul de masă pe care detectorul dvs. de masă îl poate detecta în modul SCAN. De obicei, aveți nevoie de intervalul 30-450 m/z, este suficient pentru a determina toate tipurile de medicamente. Majoritatea acestora ar putea fi stabilite între 30-350 m/z.

Procedura de pregătire a probelor:

Toate drogurile rămân sub formă de sare datorită stabilității mai mari, care permite păstrarea lor timp îndelungat fără modificări structurale. De exemplu, amfetamina are un atom de azot, este baza, care este legată de ion(i) acid(i) ca 2-(SO4), -Cl, 3-(PO4). Trebuie să obțineți baza liberă a substanței de analiză. De asemenea, dacă nu știți ce substanță aveți pentru analiză, trebuie să efectuați un experiment pentru determinarea calitativă folosind reactivi, pe care i-am menționat anterior(Reactivi pentru testarea drogurilor).

Prepararea universalului va fi destul de simplă. Puneți alicota de probă într-un balon și umpleți-l cu un solvent pur (CCl4/ CH2Cl2). Se prepară aproximativ 10-1000 mkg/ml de soluție. Majoritatea substanțelor narcotice nu pot fi rezolvate în tetraclorură de carbon/diclormetan. După aceea, trebuie să adăugați 1-2 volume de soluție apoasă de NaOH/KOH 30-40% în acest balon cu soluție medicamentoasă și să amestecați bine.

Aproape același preparat este utilizat pentru mărci(LSD, NBOMe, NBOH etc.). Luați o marcă cu cantitatea declarată de substanță și tăiați-o în balon, adăugați solvent pur (se recomandă CH2Cl2). Se prepară aproximativ 10-1000 mkg/ml de soluție. După aceea, trebuie să adăugați 1-2 volume de soluție apoasă de NaOH/KOH 30-40% în acest balon cu soluție de medicament și să amestecați bine.

Veți obține o bază liberă a medicamentului analizat, care va migra către stratul de solvent organic. Trebuie să injectați 1 mkl de soluție de medicament și să începeți analiza.

Metode GC-MS.
Pentru o gamă largă de medicamente:

Sistemul GC-MS funcționează la 70 eV în modul ionizare electronică. Aparatul este echipat cu o coloană capilară de fenil-metilsilicone 5% (30 m × 0,25 mm d.i., 0,25 m grosimea peliculei). Heliul este utilizat ca gaz purtător la un debit constant de 1 ml/min. Condițiile cromatografice au fost stabilite după cum urmează: Temperatura cuptorului se menține la 130 ◦C timp de 2 min, crește la 270 ◦C la 15 ◦C/min. Portul de injecție setat la 270 ◦C în modul split cu raito split 25:1. Detectorul de masă funcționează în modul scanare (interval de scanare de la m/z 30-390).

Pentru mărcile LSD, NBOMe, NBOH:

Sistemul GC-MS funcționează la 70 eV în modul ionizare electronică. Aparatul este echipat cu o coloană capilară de fenil-metilsilicone 5% (30 m × 0,25 mm d.i., 0,25 m grosimea peliculei). Heliul se utilizează ca gaz purtător la un debit constant de 1 ml/min. Condițiile cromatografice au fost stabilite după cum urmează: Temperatura cuptorului se menține la 40 ◦C timp de 2 min, crește la 210 ◦C la 15 ◦C/min, după care crește la 280 ◦C la 5 ◦C/min și se menține 20 min. Portul de injecție a fost setat la 280 ◦C în modul splitless. Detectorul de masă a fost operat în modul de scanare (interval de scanare de la m/z 30-450).

Concluzii:
După cum puteți vedea, prepararea probelor este destul de simplă. Nu necesită reactivi scumpi sau manipulări dificile. Cu toate acestea, această procedură este foarte importantă pentru a obține rezultate de analiză relevante.

 

[Cocojamba]

Ce se întâmplă cu alte sisteme GC-MS? Sau aceste metode funcționează numai cu Agilent sau Thermo Scientific?

 

[G.Patton]

De fapt, nu, puteți utiliza orice sistem cu aceleași specificații.