Giriş.
Bu araştırmanın temel amacı, biyolojik sıvılardaki ana ilaçların evde kamuya açık ekspres yöntemlerle belirlenme olasılığını değerlendirmektir. Bu makale aşağıdaki sorulara cevap vermektedir.
- 3-20 $ için eczane testleri beyan edilen maddelerin kullanım gerçeğini gerçekten ortaya koyar mı? (Klasik kombine test şeritleri amfetamin, metamfetamin, kokain, marihuana, opiatların belirlenmesi için ölçekler içerir).
- Bu test şeritleri Alpha-PVP ve Mephedrone için faydalı olabilir mi? (Eczanelerde özel testler bulunmamaktadır)
Satın alınması kolay olan en yaygın eczane testinin kullanılmasının nedeni, araştırmanın yararlı olması ve pratik bir uygulamaya sahip olmasıdır.
Önemli: Farklı etiketlere sahip başka yanal akış testleri (LFT'ler) kitleri kullanılabilir, üretici firma önemli değildir çünkü herhangi bir test kiti şeridi aynı çalışma mekanizmasına sahiptir ve karşılaştırılabilir etkinliğe sahiptir.
LFThakkında.
Lateral akış immünokromatografik testler veya hızlı testler olarak da bilinen lateral akış testleri (LFT'ler), özel ve maliyetli ekipmana ihtiyaç duymadan sıvı bir numunedeki hedef maddenin varlığını tespit etmeyi amaçlayan basit cihazlardır. Bu testler evde test, bakım noktası testi veya laboratuvar kullanımı için tıbbi teşhis alanında yaygın olarak kullanılmaktadır. Örneğin, evde yapılan gebelik testi spesifik bir hormonu tespit eden bir LFT'dir. Bu testler basit ve ekonomiktir ve genellikle yaklaşık beş ila 30 dakika içinde sonuç verir. Birçok laboratuvar tabanlı uygulama, ek özel ekipman kullanarak basit LFT'lerin hassasiyetini artırır.
LFT'ler enzime bağlı immünosorbent testleri (ELISA) ile aynı prensiplere göre çalışır. Temelde bu testler sıvı numuneyi, görsel olarak pozitif veya negatif sonuç gösteren reaktif moleküller içeren bir pedin yüzeyi boyunca çalıştırır. Pedler, gözenekli kağıt, mikro yapılı polimer veya sinterlenmiş polimer parçaları gibi bir dizi kılcal yatağa dayanmaktadır. Bu pedlerin her biri kendiliğinden sıvı (örn. idrar, kan, tükürük) taşıma kapasitesine sahiptir.
Numune pedi bir sünger görevi görür ve fazla miktarda numune sıvısı tutar. Sıvı ıslatıldıktan sonra, üreticinin konjugat adı verilen dondurularak kurutulmuş biyo-aktif partikülleri (aşağıya bakınız) bir tuz-şeker matrisi içinde depoladığı ikinci konjugat pedine akar. Konjugat pedi, hedef molekül (örneğin bir antijen) ile partikül yüzeyinde immobilize edilmiş olan kimyasal partneri (örneğin antikor) arasında optimize edilmiş bir kimyasal reaksiyon için gerekli tüm reaktifleri içerir. Bu işaretler partikülleri pedden geçerken hedefler ve test ve kontrol hatlarına doğru devam eder. Test çizgisi, hamilelik testlerinde olduğu gibi, genellikle renkli bir sinyal gösterir. Kontrol hattı, numunenin akıp geçmediğini ve konjugat peddeki biyo-moleküllerin aktif olup olmadığını gösteren afinite ligandları içerir. Bu reaksiyon bölgelerini geçtikten sonra sıvı, sadece bir atık kabı görevi gören son gözenekli malzeme olan fitile girer.
LFT'ler enzime bağlı immünosorbent testleri (ELISA) ile aynı prensiplere göre çalışır. Temelde bu testler sıvı numuneyi, görsel olarak pozitif veya negatif sonuç gösteren reaktif moleküller içeren bir pedin yüzeyi boyunca çalıştırır. Pedler, gözenekli kağıt, mikro yapılı polimer veya sinterlenmiş polimer parçaları gibi bir dizi kılcal yatağa dayanmaktadır. Bu pedlerin her biri kendiliğinden sıvı (örn. idrar, kan, tükürük) taşıma kapasitesine sahiptir.
Numune pedi bir sünger görevi görür ve fazla miktarda numune sıvısı tutar. Sıvı ıslatıldıktan sonra, üreticinin konjugat adı verilen dondurularak kurutulmuş biyo-aktif partikülleri (aşağıya bakınız) bir tuz-şeker matrisi içinde depoladığı ikinci konjugat pedine akar. Konjugat pedi, hedef molekül (örneğin bir antijen) ile partikül yüzeyinde immobilize edilmiş olan kimyasal partneri (örneğin antikor) arasında optimize edilmiş bir kimyasal reaksiyon için gerekli tüm reaktifleri içerir. Bu işaretler partikülleri pedden geçerken hedefler ve test ve kontrol hatlarına doğru devam eder. Test çizgisi, hamilelik testlerinde olduğu gibi, genellikle renkli bir sinyal gösterir. Kontrol hattı, numunenin akıp geçmediğini ve konjugat peddeki biyo-moleküllerin aktif olup olmadığını gösteren afinite ligandları içerir. Bu reaksiyon bölgelerini geçtikten sonra sıvı, sadece bir atık kabı görevi gören son gözenekli malzeme olan fitile girer.
İki LFT türü vardır: doğrudan ve rekabetçi yöntem.
Doğrudan (sandviç) LFT , bir konjugat membran üzerine uygulanan bir antikor-etiket konjugatı kullanır. Bu analite özgü antikorlar test hattına, birincil antikorlara özgü tür karşıtı antikorlar ise kontrol hattına immobilize edilir. Analiz edilen bir madde içeren numune test şeridine uygulandığında ve bu numune konjugat içeren membrana çarptığında, analit AT-tag konjugatına bağlanır. Daha sonra bağışıklık kompleksi test bölgesine girer ve burada spesifik antikorlara bağlanarak bir Ab-Ag-Ab-tag "sandviçi" oluşturur. Bağlanmamış konjugatın fazlası, kontrol hattındaki tür karşıtı antikorlara bağlanır. Bu nedenle, test şeridinde 2 çizgi pozitif bir test sonucudur. Numunedeanaliz edilen madde yoksa, konjugat yalnızca kontrol hattındaki anti-tür antikorlarına bağlanır ve test şeridinde tek çizgi oluşturur. Doğrudan LFT yöntemi, yüksek moleküler ağırlıklı bileşikleri - HIV dahil virüsler; çeşitli hormonlar (örneğin hamilelik testlerinde), bulaşıcı hastalıkların patojenleri - tespit etmek için kullanılır.
Düşük moleküler ağırlıklı bileşiklerin belirlenmesi için kullanılan yarışmalıLFT yöntemi, Ab-tag konjugatında bulunan spesifik antikorlar için sınırlı sayıda bağlanma bölgesi için analit ile immobilize analit:taşıyıcı protein konjugatı arasındaki rekabete dayanır. Analit içeren bir numune uygulandığında, konjugat membran üzerindeki AT-tag konjugatına bağlanır. Daha sonra immün kompleks, analit:taşıyıcı protein konjugatının immobilize edildiği test bölgesinden geçer. İmmün kompleks, sterik engeller nedeniyle bu konjugata bağlanamaz: düşük moleküler ağırlıklı bileşikler genellikle bir antijenik determinanta sahiptir ve buna bağlı olarak antikorlar, analit tarafından zaten işgal edilmiş olan bir antijen bağlanma bölgesine sahiptir. Daha sonra, bağışıklık kompleksi kontrol hattındaki tür karşıtı antikorlar tarafından bağlanır. Sonuç olarak, test bölgesinde renkli bir bandın olmaması ve kontrol bölgesinde bir rengin bulunması, test numunesindeki analit konsantrasyonunun bu test için eşik değerini aştığını gösterir.
Numunede analiz yapılmamışsa, Ab-tag konjugatı test çizgisi bölgesinde immobilize edilmiş Ag:taşıyıcı protein konjugatına bağlanır. Bağlanmamış Ab-tag konjugatı kontrol çizgisi bölgesine girer ve orada tür karşıtı antikorlarla bağlanır. Dolayısıyla, iki renkli çizginin (test ve kontrol) varlığı negatif bir analiz sonucudur.
Rekabetçi LFT formatı, idrar, oral sıvı ve doku ekstraktlarındaki narkotik bileş iklerin metabolitleri dahil olmak üzere düşük moleküler ağırlıklı bileşikleri tespit etmek için kullanılır.
Düşük moleküler ağırlıklı bileşiklerin belirlenmesi için kullanılan yarışmalıLFT yöntemi, Ab-tag konjugatında bulunan spesifik antikorlar için sınırlı sayıda bağlanma bölgesi için analit ile immobilize analit:taşıyıcı protein konjugatı arasındaki rekabete dayanır. Analit içeren bir numune uygulandığında, konjugat membran üzerindeki AT-tag konjugatına bağlanır. Daha sonra immün kompleks, analit:taşıyıcı protein konjugatının immobilize edildiği test bölgesinden geçer. İmmün kompleks, sterik engeller nedeniyle bu konjugata bağlanamaz: düşük moleküler ağırlıklı bileşikler genellikle bir antijenik determinanta sahiptir ve buna bağlı olarak antikorlar, analit tarafından zaten işgal edilmiş olan bir antijen bağlanma bölgesine sahiptir. Daha sonra, bağışıklık kompleksi kontrol hattındaki tür karşıtı antikorlar tarafından bağlanır. Sonuç olarak, test bölgesinde renkli bir bandın olmaması ve kontrol bölgesinde bir rengin bulunması, test numunesindeki analit konsantrasyonunun bu test için eşik değerini aştığını gösterir.
Numunede analiz yapılmamışsa, Ab-tag konjugatı test çizgisi bölgesinde immobilize edilmiş Ag:taşıyıcı protein konjugatına bağlanır. Bağlanmamış Ab-tag konjugatı kontrol çizgisi bölgesine girer ve orada tür karşıtı antikorlarla bağlanır. Dolayısıyla, iki renkli çizginin (test ve kontrol) varlığı negatif bir analiz sonucudur.
Rekabetçi LFT formatı, idrar, oral sıvı ve doku ekstraktlarındaki narkotik bileş iklerin metabolitleri dahil olmak üzere düşük moleküler ağırlıklı bileşikleri tespit etmek için kullanılır.
Daha basit bir açıklama.
Eğer anlamadıysanız, daha basit bir şekilde açıklayabilirim. Her test şeridinin başında etiketlenmiş antikorlar bulunmaktadır. Test şeridinin yapısı nedeniyle, idrar şerit boyunca yayılarak ortaya çıkan kompleksleri ilaç-protein bağlarının sabitlendiği test alanına taşır. Gelen bağışıklık kompleksinden gelen antikor zaten idrardaki ilaç tarafından alındığından, test bölgesinde tutunamaz ve kontrol bölgesine ilerler, burada tür karşıtı antikora bağlanır ve ölçekte bir şerit renklendirilir (pozitif sonuç).
Biyolojik numunede ilaç yoksa, antikorlar test şeridi boyunca idrarda hareket eder ve serbest kalır. Antikor-protein kompleksi test alanında buluştuğunda, bazı etiketli antikorlar ona bağlanır (ilk şerit görünür), geri kalanı kontrol alanındaki idrar akışıyla hareket eder, burada da tür karşıtı antikora bağlanır ve ikinci şeridi vurgular (2 şerit - negatif sonuç). Çizgi test bölgesinde beliriyor ancak kontrol bölgesinde belirmiyorsa (her zaman belirmelidir) - test hatalıdır.
Biyolojik numunede ilaç yoksa, antikorlar test şeridi boyunca idrarda hareket eder ve serbest kalır. Antikor-protein kompleksi test alanında buluştuğunda, bazı etiketli antikorlar ona bağlanır (ilk şerit görünür), geri kalanı kontrol alanındaki idrar akışıyla hareket eder, burada da tür karşıtı antikora bağlanır ve ikinci şeridi vurgular (2 şerit - negatif sonuç). Çizgi test bölgesinde beliriyor ancak kontrol bölgesinde belirmiyorsa (her zaman belirmelidir) - test hatalıdır.
Maddeler, yeterli bir süre boyunca psikoaktif bir şey almayan gönüllüler tarafından kullanılmış, analizleri için idrar alınmıştır. İşte deneyin sonuçları.
Deneyler
AMFETAMİNBaşlıca metabolitler: amfetamin, 4-hidroksiamfetamin, 4-hidroksinorefedrin, 4-hidroksifenilaseton, benzoik asit, hippurik asit, norefedrin, fenilaseton.
KOKAİN.
Başlıca metabolitler: benzoilekgonin, ekgonin metil ester, ekgonin, norkokain, p-hidroksikain, m-hidroksikain, p-hidroksibenzoilekgonin, m-hidroksibenzoilekgonin.
Sağdaki teste bakarsanız, test şeritlerinin neden eleştirel bir bakış açısıyla ele alınması gerektiğini görebilirsiniz. Test edilen kişi yakın zamanda kokain dışında herhangi bir PAS kullanmamıştır.
HEROİN.
Başlıca metabolitleri: morfin, normorfin, hidromorfon.
MDMA / ECSTASY.
Başlıca metabolitler: 3,4-metilendioksimetamfetamin (MDMA), 3,4-metilendioksimetamfetamin (MDA), 4-hidroksi-3-metoksimetamfetamin (HMMA), 4-hidroksi-3-metoksimetamfetamin (HMA).
MDMA / Ecstasy test şeritleri mevcuttur, ancak bunları bulmak daha zordur. İdrarda amfetamin ve metamfetamin bulunmuştur. Bu, ortak olarak aynı sınıfa ait olmaları ve buna bağlı olarak maddelerin ve metabolitlerinin yapısal benzerliği ile açıklanmaktadır. İkinci testteki THC (kannabinoidler) ve OPI (opiatlar) ölçekleri deneye katılmamıştır (aktive edilmemiştir). Soldaki fotoğrafa göre, bu maddeler MDMA kullanımı ile bağlantılı olarak tespit edilmemiştir.
MEPHEDRONE.
Başlıca metabolitler: mephedrone, nor-mephedrone, 4'-karboksi-mephedrone, 1'-dihydro-mephedrone, N-succinyl-nor-mephedrone.
https://www.zoomtesting.co.uk sitesinin editörlerinden ilginç bir yorum, "Bazı satıcılar, mefedronu tespit etmek için metamfetamin testinin kullanılabileceğine işaret ediyor. Ancak bu doğru değildir. Meth ve meph'in kimyasal yapısı farklıdır, bu nedenle metamfetamin testi mephedrone için geçerli olmayacaktır". Peki, bir kontrol edelim.
Standart maddelere ek olarak, barbitüratları test etmek için başka bir test şeridi kullanılmıştır. Bu test şeridinde açıkça bir sorun var. Test, daha önce hiç barbitürat veya bunları içeren preparatlar kullanmamış olan başka bir gönüllü tarafından tekrarlanmış ve benzer bir sonuç elde edilmiştir.
ALPHA-PVP (alfa-pirolidinovalerofenon).
PCP penceresindeki ikinci çizgi neredeyse tamamen yoktur.
MARİJUANA.
Başlıca metabolitler: tetrahidrokanabinol (THC), 11-hidroksi-THC, 11-nor-9-karboksi-THC. Kenevir iyi belirlenmiş ve her zaman sadece "THC" (tetrahidrokanabinol) penceresinde, en basit testte göstermek için yeterlidir.
Sonuç.
Testler, psikoaktif etkisinin hissedilmesinden çok daha uzun bir süredir vücut sıvılarındaki uyuşturucuları tespit etmektedir. Oldukça ucuzdurlar, iyi bir duyarlılığa sahiptirler ve laboratuvarda kullanılan yöntemlerden sadece marjinal olarak daha düşüktürler. Güvenliğinizi unutmayın - "temizliğinizi" kendiniz kontrol etmeniz gerekiyorsa, ekspres testler vazgeçilmez olacaktır.
Last edited by a moderator: