Introduktion.
Phenyltetrahydroimidazothiazol (dvs. levamisol, dexamisol, ortetramisol) er i stigende grad blevet brugt som skærestof af sydamerikanske ulovlige kokainlaboratorier i de sidste otte år og er nu det mest fremherskende forfalskningsmiddel i kokain, der produceres i Colombia. Saltformen af ulovlig kokain skal bestemmes, når det er muligt af hensyn til strafudmålingen; dette gøres typisk ved hjælp af infrarød spektroskopi. To separationsteknikker for kokain/phenyltetrahydroimidazothiazol-blandinger præsenteres for almindelige brugere eller sælgere. Blandinger af kokain (hydrochlorid og base) og phenyltetrahydroimidazothiazol (85:15, 70:30 og 50:50) blev fremstillet og adskilt med væske/væske-ekstraktion og ionpar-kromatografi. Genvundet kokain blev efterfølgende analyseret via infrarød spektroskopi, gaskromatografi-flammeioniseringsdetektion og isotopforholdsmassespektrometri. En kvalitativ reaktion til bestemmelse af svovl i organiske forbindelser vil også blive beskrevet.
Kvalitativ metode til bestemmelse af svovl i tetramisol.
Det skal du bruge:- Metallisk natrium;
- Reagensglas (2 eller flere);
- Filterpapir;
- Alkoholbrænder;
- Porcelænskop;
- Glasstang;
- Natriumnitroprussid/10% saltsyre/eddikesyre+ blyacetat.
Vigtigt: Det er nødvendigt at bruge sikkerhedsbriller, beskyttelsestøj (kemisk eller medicinsk kittel), beskyttelseshandsker; Eksperimenter i et udtræksrum eller et godt ventileret område!
Metode:
Påvisning af tetramisol ved at fusionere kokain med metallisk natrium. Svovl fra tetramisol-heterocyklen findes i kokainproduktet på følgende måde: Først smeltes prøven sammen med metallisk natrium, det frigjorte svovl danner sulfid med natrium.
Sulfidionen bestemmes ved konventionelle kvalitative reaktioner. Flere klumper af den analyserede kokain, som angiveligt er blandet med tetramisol, og et stykke metallisk natrium med en skinnende overflade på størrelse med en halv ært indføres i et tørt reagensglas. Natrium skal strippes for oxider og presses ud på filterpapir fra petroleum (som det opbevares i). Derefter udføres fusionen. Røret opvarmes forsigtigt i en flamme på en alkoholbrænder, indtil det er rødglødende, og holdes i 1-2 minutter. Det er nødvendigt, at natrium smelter sammen med kokainprøven, for ellers dannes der ikke natriumsulfid. Derefter dyppes den rødglødende ende af reagensglasset ned i en porcelænskop med 3 ml destilleret vand. Røret vil revne(pas på! Hvis natriummet ikke har reageret fuldt ud, kan der opstå et lynnedslag!) Smeltestykker knuses med en glasstav, og den farveløse opløsning hældes i et reagensglas (om nødvendigt filtreres den gennem et lille papirfilter). Hvis det organiske stof ikke er helt ødelagt, er væsken brun eller sort. I dette tilfælde gentages fusionen af teststoffet med natrium.
Natriumnitroprussidopløsning 0,5 ml af 2% tilsættes til prøveopløsningen. Der fremkommer en intens rødviolet farve, som gradvist bliver brun.
Du kan også eksperimentere med en 10% saltsyreopløsning, og der fremkommer en karakteristisk lugt.
Den tredje metode er at tilsætte et par dråber eddikesyre og derefter 0,5 ml af en 2 % opløsning af blyacetat. Væsken bliver brun eller sort, og nogle gange kommer der et sort bundfald. Slamdannelsen fremskyndes ved opvarmning.
Kvalitative reaktioner viste svovl i prøven af kokain, det betyder, at prøven indeholder tetramisol eller et andet svovlorganisk stof.
Metode:
Påvisning af tetramisol ved at fusionere kokain med metallisk natrium. Svovl fra tetramisol-heterocyklen findes i kokainproduktet på følgende måde: Først smeltes prøven sammen med metallisk natrium, det frigjorte svovl danner sulfid med natrium.
Sulfidionen bestemmes ved konventionelle kvalitative reaktioner. Flere klumper af den analyserede kokain, som angiveligt er blandet med tetramisol, og et stykke metallisk natrium med en skinnende overflade på størrelse med en halv ært indføres i et tørt reagensglas. Natrium skal strippes for oxider og presses ud på filterpapir fra petroleum (som det opbevares i). Derefter udføres fusionen. Røret opvarmes forsigtigt i en flamme på en alkoholbrænder, indtil det er rødglødende, og holdes i 1-2 minutter. Det er nødvendigt, at natrium smelter sammen med kokainprøven, for ellers dannes der ikke natriumsulfid. Derefter dyppes den rødglødende ende af reagensglasset ned i en porcelænskop med 3 ml destilleret vand. Røret vil revne(pas på! Hvis natriummet ikke har reageret fuldt ud, kan der opstå et lynnedslag!) Smeltestykker knuses med en glasstav, og den farveløse opløsning hældes i et reagensglas (om nødvendigt filtreres den gennem et lille papirfilter). Hvis det organiske stof ikke er helt ødelagt, er væsken brun eller sort. I dette tilfælde gentages fusionen af teststoffet med natrium.
Natriumnitroprussidopløsning 0,5 ml af 2% tilsættes til prøveopløsningen. Der fremkommer en intens rødviolet farve, som gradvist bliver brun.
Du kan også eksperimentere med en 10% saltsyreopløsning, og der fremkommer en karakteristisk lugt.
Den tredje metode er at tilsætte et par dråber eddikesyre og derefter 0,5 ml af en 2 % opløsning af blyacetat. Væsken bliver brun eller sort, og nogle gange kommer der et sort bundfald. Slamdannelsen fremskyndes ved opvarmning.
Kvalitative reaktioner viste svovl i prøven af kokain, det betyder, at prøven indeholder tetramisol eller et andet svovlorganisk stof.
Eksperimenter.
Materialer.
Celite 545 og alle anvendte kemikalier og opløsningsmidler var af reagenskvalitet eller bedre og blev hentet fra Sigma-Aldrich. Kokainhydrochlorid (HCl) og tetramisol HCl blev hentet fra dette laboratoriums samling af referencematerialer. De glaskromatografiske kolonner, der blev brugt til ionparseparationer, var 260 mm × 22 mm i.d. med en stilklængde på 50 mm. Kolonneforberedelse: Celite 545 stationære faser blev brugt uden nogen forbehandling; en kolonne pakket med en blanding af Celite545 og stoffer beskrevet nedenfor.
Væske/væske-separationer.
Kombinationer af vandige/organiske opløsningsmidler blev brugt til at adskille blandinger af kokain HCl og tetramisol HCl (85:15, 70:30, 50:50). Hver af de 50 mg kokain HCl/tetramisol HCl-blandinger (85:15, 70:30, 50:50) blev omdannet til baseformen ved at opløse blandingen i kogende vand og tilsætte fortyndet ammoniumhydroxid (NH4OH), indtil opløsningen var basisk, og der skete en udfældning.
Blandingen fik lov til at køle af, og vandet blev fjernet. Den resterende baseblanding fik lov til at tørre natten over. Ti portioner på 50 mg blev kombineret med 5 ml hexan i 10 separate 15 ml glascentrifugerør med rund bund (fem reagensglas pr. opløsningsmiddel). Alle prøver blev opvarmet ved 75 °C i ca. 5 minutter. Når opløsningerne var afkølet, blev der tilsat 5 ml vand til hvert reagensglas. Prøverne blev rystet kraftigt og centrifugeret i 2 minutter. Opløsningsmiddellaget blev fjernet og vasket igen med vand. Vaskeprocessen blev gentaget op til fem gange (tabel 1). Det vaskede opløsningsmiddel blev inddampet til tørhed og undersøgt via FTIR og GC/FID.
Celite 545 og alle anvendte kemikalier og opløsningsmidler var af reagenskvalitet eller bedre og blev hentet fra Sigma-Aldrich. Kokainhydrochlorid (HCl) og tetramisol HCl blev hentet fra dette laboratoriums samling af referencematerialer. De glaskromatografiske kolonner, der blev brugt til ionparseparationer, var 260 mm × 22 mm i.d. med en stilklængde på 50 mm. Kolonneforberedelse: Celite 545 stationære faser blev brugt uden nogen forbehandling; en kolonne pakket med en blanding af Celite545 og stoffer beskrevet nedenfor.
Væske/væske-separationer.
Kombinationer af vandige/organiske opløsningsmidler blev brugt til at adskille blandinger af kokain HCl og tetramisol HCl (85:15, 70:30, 50:50). Hver af de 50 mg kokain HCl/tetramisol HCl-blandinger (85:15, 70:30, 50:50) blev omdannet til baseformen ved at opløse blandingen i kogende vand og tilsætte fortyndet ammoniumhydroxid (NH4OH), indtil opløsningen var basisk, og der skete en udfældning.
Blandingen fik lov til at køle af, og vandet blev fjernet. Den resterende baseblanding fik lov til at tørre natten over. Ti portioner på 50 mg blev kombineret med 5 ml hexan i 10 separate 15 ml glascentrifugerør med rund bund (fem reagensglas pr. opløsningsmiddel). Alle prøver blev opvarmet ved 75 °C i ca. 5 minutter. Når opløsningerne var afkølet, blev der tilsat 5 ml vand til hvert reagensglas. Prøverne blev rystet kraftigt og centrifugeret i 2 minutter. Opløsningsmiddellaget blev fjernet og vasket igen med vand. Vaskeprocessen blev gentaget op til fem gange (tabel 1). Det vaskede opløsningsmiddel blev inddampet til tørhed og undersøgt via FTIR og GC/FID.
Ion-par-separationer.
Der blev fremstillet tre ionpar-kolonner til at adskille blandinger af kokain HCl og tetramisol HCl (85:15, 70:30 og 50:50). Halvtreds mg kokain HCl/tetramisol HCl blev opløst i 250 μL vand, kombineret med 0,5 g Celite 545 og blandet godt. Den resulterende blanding blev overført til en kolonne pakket med en portion Celite 545 og 1-2 mL ionparopløsning som specificeret i næste tabel 2. Kokain blev elueret med 35 mL vandmættet chloroform. Fem fraktioner på 5 ml blev opsamlet og analyseret via GC/FID for mængden af kokain. Passende fraktioner blev kombineret, inddampet til tørhed og undersøgt via FTIR.Resultater og diskussion.
Væske/væske-separationer.De tre blandinger af kokainbase/tetramisolbase (85:15, 70:30, 50:50) blev opløst i hexan og vasket med vand gentagne gange. Som vist i tabel 2 blev tetramisolbase i 85:15- og 70:30-blandingerne fjernet fuldstændigt fra hexan efter vask med vand fem gange på grund af dens foretrukne opløselighed i vand i forhold til kokain. Efter fem vaske af 50:50-blandingen blev der opnået 99+% ren kokain.
Ion-par-separationer.
Der blev fremstillet tre separate kolonner med forskellige stationære fasepræparater. Som vist i tabel 3 gav kolonne 1 den bedste adskillelse med rene kokainfraktioner (PTHIT-fri) for alle tre testede blandinger (85, 70 og 50 % kokain HCl).
Rene kokainfraktioner blev også opsamlet med kolonne 2 og 3 for 85:15 kokain HCl/tetramisol HCl-blandingen, men der blev påvist meget små mængder PTHIT med 70:30- og 50:50-blandingerne. For at kunne adskille en ionparopløsning er det vigtigt at bestemme saltformen af kokain i udgangsmaterialet.
Kendskab til saltformen før brug af en separationsteknik (væske/væske- eller ionpar-kromatografi) vil forhindre en analytiker i utilsigtet at ændre kokainens saltform under fjernelse af phenyltetrahydroimidazothiazol.
Ion-par-separationer.
Der blev fremstillet tre separate kolonner med forskellige stationære fasepræparater. Som vist i tabel 3 gav kolonne 1 den bedste adskillelse med rene kokainfraktioner (PTHIT-fri) for alle tre testede blandinger (85, 70 og 50 % kokain HCl).
Rene kokainfraktioner blev også opsamlet med kolonne 2 og 3 for 85:15 kokain HCl/tetramisol HCl-blandingen, men der blev påvist meget små mængder PTHIT med 70:30- og 50:50-blandingerne. For at kunne adskille en ionparopløsning er det vigtigt at bestemme saltformen af kokain i udgangsmaterialet.
Kendskab til saltformen før brug af en separationsteknik (væske/væske- eller ionpar-kromatografi) vil forhindre en analytiker i utilsigtet at ændre kokainens saltform under fjernelse af phenyltetrahydroimidazothiazol.
Konklusioner.
Der blev anvendt to teknikker til adskillelse af kokain- og tetramisolblandinger. GC/FID- og FTIR-data blev opnået for effektivt at bestemme renheden og saltformen af det genvundne kokain. For blandinger af kokainbase/tetramisolbase var den bedste metode til at rense kokainen en væske/væskeseparation med hexan og vand; fem vandvaskninger fjernede med succes tetramisolbase fra kokainen. Den mest vellykkede teknik til adskillelse af kokain HCl/tetramisol HCl anvendte en ionpar-kromatografisk kolonne pakket med 4 g Celite 545 og 2 mL 1 N HCl/2M NaCl.
Last edited by a moderator:
