Giriş
Feniltetrahidroimidazotiyazol (yani levamizol, deksamizol, ortetramizol) son sekiz yıldır Güney Amerika'daki yasadışı kokain laboratuvarları tarafından kesici bir madde olarak giderek daha fazla kullanılmaktadır ve şu anda Kolombiya'da üretilen kokainde en baskın tağşiş maddesidir. Yasadışı kokainin tuz formu, mümkün olduğunda ceza verme amacıyla belirlenmelidir; bu genellikle kızılötesi spektroskopi yoluyla yapılır. Kokain/feniltetrahidroimidazotiyazol karışımları için iki ayırma tekniği yaygın kullanıcılara veya satıcılara sunulmaktadır. Kokain (hidroklorür ve baz) ve feniltetrahidroimidazotiyazol (85:15, 70:30 ve 50:50) karışımları hazırlanmış ve sıvı/sıvı ekstraksiyonu ve iyon-çifti kromatografisi ile ayrılmıştır. Geri kazanılan kokain daha sonra kızılötesi spektroskopisi, gaz kromatografisi-alev iyonizasyon tespiti ve izotop oranı kütle spektrometresi ile analiz edilmiştir. Organik bileşiklerde sülfür tayini için kalitatif bir reaksiyon da açıklanacaktır.
Tetramisol sülfür için kalitatif yöntem.
İhtiyacınız olan:- Metalik sodyum;
- Test tüpü (2 veya daha fazla);
- Filtre kağıdı;
- Alkol yakıcı;
- Porselen fincan;
- Cam çubuk;
- Sodyum nitroprussid/%10 hidroklorik asit/asetik asit+ kurşun asetat.
Önemli: Koruyucu gözlük, koruyucu giysi (kimyasal veya tıbbi önlük), koruyucu eldiven kullanılması gerekir; Çekme odada veya iyi havalandırılmış bir alanda deney yapın!
Yöntem:
Kokainin metalik sodyum ile kaynaştırılmasıyla tetramisolün saptanması. Tetramisol heterosiklinden gelen sülfür kokain ürününde şu şekilde bulunur: ilk olarak numune metalik sodyum ile kaynaştırılır, açığa çıkan sülfür sodyum ile sülfür oluşturur.
Sülfür iyonu geleneksel kalitatif reaksiyonlarla belirlenir. Tetramisol ile karıştırıldığı varsayılan analiz edilmiş kokainden birkaç topak ve yarım bezelye büyüklüğünde parlak bir yüzeye sahip bir metalik sodyum parçası kuru bir test tüpüne konur. Sodyum oksitlerinden arındırılmalı, filtre kağıdı üzerinde gazyağından (içinde saklandığı) sıkılmalıdır. Daha sonra füzyon gerçekleştirilir. Tüp, bir alkol brülörünün alevinde kırmızı-sıcak olana kadar hafifçe ısıtılır ve 1-2 dakika tutulur. Sodyumun kokain örneğiyle birlikte erimesi gereklidir çünkü aksi takdirde sodyum sülfür oluşmaz. Daha sonra test tüpünün kızgın ucu, içinde 3 ml damıtılmış su bulunan porselen bir kaba daldırılır. Tüp çatlayacaktır(dikkatli olun! Sodyum tam olarak tepkimeye girmemişse parlama meydana gelebilir!). Eriyik parçaları bir cam çubukla ezilir ve renksiz çözelti bir test tüpüne dökülür (gerekirse küçük bir kağıt filtreden süzülür). Organik madde tamamen yok edilmemişse, sıvı kahverengi veya siyahtır. Bu durumda, test maddesinin sodyum ile füzyonu tekrarlanır.
Numune çözeltisine 0,5 ml %2'lik sodyum nitroprussid çözeltisi eklenir. Yoğun bir kırmızı-mor renk ortaya çıkar ve yavaş yavaş kahverengiye dönüşür.
Ayrıca %10 hidroklorik asit çözeltisi ile de deney yapabilirsiniz ve karakteristik bir koku ortaya çıkar.
Üçüncü yöntem, birkaç damla asetik asit eklemek ve ardından 0,5 ml %2'lik kurşun asetat çözeltisi eklemektir. Sıvı kahverengi veya siyaha döner, bazen siyah bir çökelti ortaya çıkar. Çamur oluşumu ısıtma ile hızlandırılır.
Nitel reaksiyonlar kokain örneğinde sülfür olduğunu gösterir, bu da örneğin tetramisol veya başka bir sülfür-organik madde içerdiği anlamına gelir.
Yöntem:
Kokainin metalik sodyum ile kaynaştırılmasıyla tetramisolün saptanması. Tetramisol heterosiklinden gelen sülfür kokain ürününde şu şekilde bulunur: ilk olarak numune metalik sodyum ile kaynaştırılır, açığa çıkan sülfür sodyum ile sülfür oluşturur.
Sülfür iyonu geleneksel kalitatif reaksiyonlarla belirlenir. Tetramisol ile karıştırıldığı varsayılan analiz edilmiş kokainden birkaç topak ve yarım bezelye büyüklüğünde parlak bir yüzeye sahip bir metalik sodyum parçası kuru bir test tüpüne konur. Sodyum oksitlerinden arındırılmalı, filtre kağıdı üzerinde gazyağından (içinde saklandığı) sıkılmalıdır. Daha sonra füzyon gerçekleştirilir. Tüp, bir alkol brülörünün alevinde kırmızı-sıcak olana kadar hafifçe ısıtılır ve 1-2 dakika tutulur. Sodyumun kokain örneğiyle birlikte erimesi gereklidir çünkü aksi takdirde sodyum sülfür oluşmaz. Daha sonra test tüpünün kızgın ucu, içinde 3 ml damıtılmış su bulunan porselen bir kaba daldırılır. Tüp çatlayacaktır(dikkatli olun! Sodyum tam olarak tepkimeye girmemişse parlama meydana gelebilir!). Eriyik parçaları bir cam çubukla ezilir ve renksiz çözelti bir test tüpüne dökülür (gerekirse küçük bir kağıt filtreden süzülür). Organik madde tamamen yok edilmemişse, sıvı kahverengi veya siyahtır. Bu durumda, test maddesinin sodyum ile füzyonu tekrarlanır.
Numune çözeltisine 0,5 ml %2'lik sodyum nitroprussid çözeltisi eklenir. Yoğun bir kırmızı-mor renk ortaya çıkar ve yavaş yavaş kahverengiye dönüşür.
Ayrıca %10 hidroklorik asit çözeltisi ile de deney yapabilirsiniz ve karakteristik bir koku ortaya çıkar.
Üçüncü yöntem, birkaç damla asetik asit eklemek ve ardından 0,5 ml %2'lik kurşun asetat çözeltisi eklemektir. Sıvı kahverengi veya siyaha döner, bazen siyah bir çökelti ortaya çıkar. Çamur oluşumu ısıtma ile hızlandırılır.
Nitel reaksiyonlar kokain örneğinde sülfür olduğunu gösterir, bu da örneğin tetramisol veya başka bir sülfür-organik madde içerdiği anlamına gelir.
Deneyler.
Malzemeler.
Celite 545 ve kullanılan tüm kimyasallar ve çözücüler reaktif sınıfı veya daha iyisidir ve Sigma-Aldrich'ten temin edilmiştir. Kokain hidroklorür (HCl) ve tetramisol HCl bu laboratuvarın referans malzeme koleksiyonundan temin edilmiştir. İyon-eşleşmeleri için kullanılan cam kromatografik kolonlar 260 mm× 22 mm i.d. ve 50 mm sap uzunluğuna sahipti. Kolonların hazırlanması: Celite 545 sabit fazları herhangi bir ön işleme tabi tutulmadan kullanılmıştır; Celite545 ve aşağıda açıklanan maddelerin karışımı ile paketlenmiş bir kolon.
Sıvı/sıvı Ayırmaları.
Kokain HCl ve tetramisol HCl (85:15, 70:30, 50:50) karışımlarını ayırmak için sulu/organik çözücü kombinasyonları kullanılmıştır. 50 mg kokain HCl/tetramisol HCl karışımlarının her biri (85:15, 70:30, 50:50), karışımın kaynar suda çözülmesi ve çözelti bazik olana ve çökelme meydana gelene kadar seyreltik amonyum hidroksit (NH4OH) eklenmesiyle baz formuna dönüştürülmüştür.
Karışım soğumaya bırakıldı ve su uzaklaştırıldı. Kalan baz karışımı gece boyunca kurumaya bırakıldı. On adet 50 mg'lık kısım, 10 ayrı 15 ml'lik cam yuvarlak tabanlı santrifüj tüpünde (çözücü başına beş test tüpü) 5 ml hekzan ile birleştirildi. Tüm numuneler 75 °C'de yaklaşık 5 dakika ısıtılmıştır. Çözeltiler soğutulduktan sonra her bir test tüpüne 5 ml su eklenmiştir. Örnekler kuvvetlice çalkalanmış ve 2 dakika santrifüjlenmiştir. Çözücü tabaka çıkarıldı ve tekrar su ile yıkandı. Yıkama işlemi beş defaya kadar tekrarlandı (Tablo 1). Yıkanan çözücü kuruluğa kadar buharlaştırıldı ve FTIR ve GC/FID ile incelendi.
Celite 545 ve kullanılan tüm kimyasallar ve çözücüler reaktif sınıfı veya daha iyisidir ve Sigma-Aldrich'ten temin edilmiştir. Kokain hidroklorür (HCl) ve tetramisol HCl bu laboratuvarın referans malzeme koleksiyonundan temin edilmiştir. İyon-eşleşmeleri için kullanılan cam kromatografik kolonlar 260 mm× 22 mm i.d. ve 50 mm sap uzunluğuna sahipti. Kolonların hazırlanması: Celite 545 sabit fazları herhangi bir ön işleme tabi tutulmadan kullanılmıştır; Celite545 ve aşağıda açıklanan maddelerin karışımı ile paketlenmiş bir kolon.
Sıvı/sıvı Ayırmaları.
Kokain HCl ve tetramisol HCl (85:15, 70:30, 50:50) karışımlarını ayırmak için sulu/organik çözücü kombinasyonları kullanılmıştır. 50 mg kokain HCl/tetramisol HCl karışımlarının her biri (85:15, 70:30, 50:50), karışımın kaynar suda çözülmesi ve çözelti bazik olana ve çökelme meydana gelene kadar seyreltik amonyum hidroksit (NH4OH) eklenmesiyle baz formuna dönüştürülmüştür.
Karışım soğumaya bırakıldı ve su uzaklaştırıldı. Kalan baz karışımı gece boyunca kurumaya bırakıldı. On adet 50 mg'lık kısım, 10 ayrı 15 ml'lik cam yuvarlak tabanlı santrifüj tüpünde (çözücü başına beş test tüpü) 5 ml hekzan ile birleştirildi. Tüm numuneler 75 °C'de yaklaşık 5 dakika ısıtılmıştır. Çözeltiler soğutulduktan sonra her bir test tüpüne 5 ml su eklenmiştir. Örnekler kuvvetlice çalkalanmış ve 2 dakika santrifüjlenmiştir. Çözücü tabaka çıkarıldı ve tekrar su ile yıkandı. Yıkama işlemi beş defaya kadar tekrarlandı (Tablo 1). Yıkanan çözücü kuruluğa kadar buharlaştırıldı ve FTIR ve GC/FID ile incelendi.
İyon-Çifti ayırmaları.
Kokain HCl ve tetramisol HCl karışımlarını (85:15, 70:30 ve 50:50) ayırmak için üç iyon çifti kolonu hazırlanmıştır. Elli mg kokain HCl/tetramisol HCl 250 μL suda çözüldü, 0,5 g Celite 545 ile birleştirildi ve iyice karıştırıldı. Elde edilen karışım, bir kısım Celite 545 ve sonraki Tablo 2'de belirtildiği gibi 1-2 mL iyon çifti çözeltisi ile doldurulmuş bir kolona aktarılmıştır. Kokain 35 mL suya doymuş kloroform ile elüe edilmiştir. Beş adet 5 ml'lik fraksiyon toplanmış ve mevcut kokain miktarı için GC/FID yoluyla analiz edilmiştir. Uygun fraksiyonlar birleştirildi, kuruluğa kadar buharlaştırıldı ve FTIR ile incelendi.Sonuçlar ve Tartışma.
Sıvı/sıvı Ayrıştırmaları.Üç kokain bazı/tetramizol bazı karışımı (85:15, 70:30, 50:50) hekzan içinde çözülmüş ve tekrar tekrar su ile yıkanmıştır. Tablo 2'de gösterildiği gibi, 85:15 ve 70:30 karışımlarındaki tetramisol baz, kokaine kıyasla sudaki tercihli çözünürlüğü nedeniyle beş kez suyla yıkandıktan sonra hekzandan tamamen uzaklaştırılmıştır. 50:50 karışımının beş kez yıkanmasından sonra %99+ saf kokain elde edilmiştir.
İyon Çifti Ayırmaları.
Farklı sabit faz preparatları ile üç ayrı kolon hazırlanmıştır. Tablo 3'te gösterildiği gibi, Kolon 1 test edilen üç karışım için de (%85, 70 ve 50 kokain HCl) saf kokain fraksiyonları (PTHIT içermeyen) ile en iyi ayırmayı sağlamıştır.
Saf kokain fraksiyonları 85:15 kokain HCl/tetramisol HCl karışımı için Kolon 2 ve 3 ile de toplanmıştır, ancak 70:30 ve 50:50 karışımlarında çok az miktarda PTHIT tespit edilmiştir. Bir iyon çifti çözeltisini basitleştirerek ayırmak için, başlangıç malzemesindeki kokainin tuz formunu belirlemek önemlidir.
Bir ayırma tekniği (sıvı/sıvı veya iyon-çifti kromatografisi) kullanılmadan önce tuz formunun bilinmesi, analistin feniltetrahidroimidazotiyazolün uzaklaştırılması sırasında kokainin tuz formunu yanlışlıkla değiştirmesini önleyecektir.
İyon Çifti Ayırmaları.
Farklı sabit faz preparatları ile üç ayrı kolon hazırlanmıştır. Tablo 3'te gösterildiği gibi, Kolon 1 test edilen üç karışım için de (%85, 70 ve 50 kokain HCl) saf kokain fraksiyonları (PTHIT içermeyen) ile en iyi ayırmayı sağlamıştır.
Saf kokain fraksiyonları 85:15 kokain HCl/tetramisol HCl karışımı için Kolon 2 ve 3 ile de toplanmıştır, ancak 70:30 ve 50:50 karışımlarında çok az miktarda PTHIT tespit edilmiştir. Bir iyon çifti çözeltisini basitleştirerek ayırmak için, başlangıç malzemesindeki kokainin tuz formunu belirlemek önemlidir.
Bir ayırma tekniği (sıvı/sıvı veya iyon-çifti kromatografisi) kullanılmadan önce tuz formunun bilinmesi, analistin feniltetrahidroimidazotiyazolün uzaklaştırılması sırasında kokainin tuz formunu yanlışlıkla değiştirmesini önleyecektir.
Sonuçlar.
Kokain ve tetramisol karışımlarının ayrıştırılması için iki teknik kullanılmıştır. Geri kazanılan kokainin saflığını ve tuz formunu etkili bir şekilde belirlemek için GC/FID ve FTIR verileri elde edilmiştir. Kokain bazı/tetramisol bazı karışımları için, kokaini saflaştırmak için en iyi yöntem hekzan ve su kullanan bir sıvı/sıvı ayrıştırmasıydı; beş su yıkaması kokainden tetramisol bazını başarıyla uzaklaştırdı. Kokain HCl/tetramisol HCl'nin ayrılması için en başarılı teknik, 4 g Celite 545 ve 2 mL 1 N HCl/2M NaCl ile doldurulmuş bir iyon çifti kromatografik kolon kullanmıştır.
Last edited by a moderator:
